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真核 DNA 複製與表達系統

分子生物學家可以通過使用酵母等真核細胞作為宿主來克隆和表達真核基因，從而避免真核-細菌不相容的問題。酵母是一種單細胞真菌，與細菌一樣易於培養，並且具有質粒，這在真核生物中是罕見的。

除了能夠進行 RNA 剪接外，使用真核宿主細胞還有一個優勢，即許多真核蛋白在翻譯後如果不經過修飾（例如在內質網和高爾基體中添加碳水化合物基團或脂質基團），則無法發揮功能。細菌細胞缺乏膜結構的胞器，無法進行這些修飾，如果需要這種處理的基因產物來自哺乳動物基因，即使是酵母細胞也可能無法正確修飾該蛋白質。幾種培養的細胞類型已被證明可成功作為宿主細胞使用，包括一些哺乳動物細胞系和可以被攜帶重組 DNA 的病毒感染的昆蟲細胞系。

科學家還開發了其他將重組 DNA 引入真核細胞的方法。在電穿孔技術中，對含有細胞的溶液施加短暫的電脈衝，這會在細胞的質膜上產生臨時孔隙，使 DNA 可以進入。（這種技術現在也普遍應用於細菌中。）或者，科學家可以使用顯微鏡下的細針直接將 DNA 注入單個真核細胞。另一種將 DNA 引入植物細胞的方法是使用土壤細菌 Agrobacterium tumefaciens，這一點我們稍後會討論。無論使用哪種方法，如果引入的 DNA 通過基因重組整合到細胞的基因組中，那麼該 DNA 可以被細胞穩定表達。通過在細胞中表達不同版本的基因，研究人員可以研究蛋白質的功能，我們將在概念 19.2 中再次探討這一主題。