公職◆保健食品概論題庫下載題庫

體外哺乳類細胞基因毒性分析 一 般 使 用 體 外 哺 乳 類 細 胞 的 染 色 體 異 常 分 析 法 (In vitro Chromosomal aberration test with mammalian cells in culture)或體外鼷 鼠淋巴瘤 tk 分析法(In vitro mouse lymphoma tk assay)。

2.2. 體外鼷鼠淋巴瘤 tk 分析法

2.2.1. 細胞：使用 L5178Y tk+/-鼷鼠淋巴瘤細胞株。

2.2.2. 試驗濃度範圍：進行三個以上試驗濃度組，濃度間隔可為 2 倍或半對數 (half log，~√10倍)。依據初步試驗結果決定最 高試驗濃度：以受試產品會造成 80%以上之細胞死亡的濃度 為最高濃度。若無觀察到細胞毒性，則以 5 mg/mL 作為最高 濃度。若受試產品為低溶解度物質，則以產生最少沉澱物的 濃度作為測試的最高濃度，但最高濃度皆不超過 5 mg/mL。

2.2.3. 對照組：包含陰性對照組與陽性對照組。相關說明請參照貳、四、(一)、1、1.3.。

2.2.4. 代謝活化：進行含有與不含有 S9 混合物的測試。相關說明請參照貳、四、(一)、1、1.4.。

2.2.5. 實驗步驟：

2.2.5.1. 細胞在受試產品處理後之適當時機，清洗去除受試產品 後，細胞繼續培養以測定其存活率，同時觀察細胞表現 是 否 因 受 試 產 品 而 誘 發 致 突 變 表 現 型 (mutant phenotype)。

2.2.5.2. 細胞分別培養於含或不含嘧啶類似物培養液中，經過足 以表現引發致突變表現型的適當培養時間，測定其致 突 變 數 量 (numbers of mutants) 及 細 胞 複 製 之 效 率 (cloning efficiency)。嘧啶類似物如 bromodeoxyuridine (BrdU)、fluorodeoxyuridine (FdU)或 trifluorothymidine (TFT)等。

2.2.6. 試驗結果之表示：以表格方式描述每劑量組之細胞突變及存 活之數目，同時計算細胞之存活率、複製效率及細胞致突變 之頻率。 

http://www.capa.org.tw/upfiles/1585037012.pdf