52.下列關於南方墨點法的敘述,何者最正確?
(A)通常用於檢測基因表現量
(B)使用的探針通常會用放射線同位素或冷光等加以標記
(C)使用的探針通常會直接加入電泳膠中進行檢測
(D)通常用來檢測核酸與蛋白質分子之間的結合
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統計: A(167), B(523), C(139), D(161), E(0) #670325
統計: A(167), B(523), C(139), D(161), E(0) #670325
詳解 (共 3 筆)
#6462774
(A) 通常用於檢測基因表現量
這是 北方墨點法(Northern blot) 的用途,因為它是用來檢測 RNA,反映基因表現量。
而 南方墨點法(Southern blot) 是用來檢測 DNA 序列,不是用來量測表現量。
(B) 使用的探針通常會用放射線同位素或冷光等加以標記
Southern blot 使用的探針是互補 DNA(cDNA),會透過放射性同位素(如 P-32)、冷光(chemiluminescence)、或螢光標記,使探針與目標 DNA 雜交後可以偵測。
(C) 使用的探針通常會直接加入電泳膠中進行檢測
Southern blot 的步驟是:
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DNA 電泳分離
-
轉印至膜(如硝酸纖維素或尼龍膜)
-
再將標記的探針與其雜交
探針不是直接加入電泳膠中。
(D) 通常用來檢測核酸與蛋白質分子之間的結合
這是 南方墨點法的錯誤應用,正確的方法名稱應該是 Western blot(檢測蛋白質)或 EMSA(electrophoretic mobility shift assay)用來看蛋白質與核酸之間的結合。
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