7. 基因轉殖植物常用的方法,下列何者不正確?
(A) CaCl2 處理後轉形法(transformation)
(B) 脂質體(liposome)導入法
(C) 基因槍導入法
(D) 電穿孔法(electroporation)
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統計: A(619), B(270), C(44), D(76), E(0) #1819560
統計: A(619), B(270), C(44), D(76), E(0) #1819560
詳解 (共 4 筆)
#5921897
A.轉型法是指細菌非植物
轉形作用(也稱轉化作用)是從細胞膜直接將異源DNA分子納入細胞內,使受體細胞獲得新的遺傳性狀的方法之一,以細菌而言,另外兩個常見的方法分別是接合作用(conjugation)與轉導作用(transduction),為微生物遺傳學、分子遺傳學、基因工程等研究領域的基本實驗技術。
在自然情況下,極少種類的細菌會發生轉形作用。現在以人工的方法也能達成轉形作用,首先是將細菌製作成勝任細胞(competent cell),經過一些特殊方法,像是電擊、CaCl2、RuCl等化學試劑的處理後,細胞膜的通透性發生變化,成為能容許外源DNA通過的勝任細胞。在一定條件下,將外源DNA與勝任細胞混合保溫,使外源DNA 分子進入受體細胞。進入細胞的DNA分子經過複製、轉錄、轉譯等生化過程,使受體細胞出現新的遺傳性狀。經過轉形後的細胞,亦即帶有異源DNA的受體細胞,以重組作用將之併入其本身的染色體中,又稱為重組細胞(recombinant cell)。
如何將包裝於質體DNA中 的基因送入植物細胞中的方式就有很多種,分述如下:
農桿菌轉殖法
自然界中之植物農桿菌 (或稱腫瘤菌, Agrobacterium spp.)之細胞內含有會使植物產生腫 瘤之質體,稱之Ti質體 (tumor inducing plasmid)。這種質體會在農桿菌感染宿主植物時嵌入植 物的染色體DNA,達成穩定的基因轉移。因此,只要事先將目標基因插入Ti質體,且將Ti質 體中會造成植物產生腫瘤的基因去除,即能有效達成基因轉殖之目的。
電穿孔處理法(electroporation)
此技術乃將植物組織浸於大量目標DNA溶液中,通以瞬間高電壓之直流電,此時細胞即 很容易吸收大量外來的DNA。但進行此技術時,需先將植物之細胞壁除去,以原生質體的形 態進行,待轉殖成功再利用組織培養使之再生。
花粉管導入法
1983年中國科學院周光宇教授首創,利用針筒將目標DNA直接由柱頭注入,再篩選種 子,即可得轉殖成功之植株。
粒子槍導入法
將載有外來基因的質體核酸包以高密的鎢粒子(~1um),使之成一微小物體,用粒子槍 (particle gun) 高速打入植物細胞中,經組織培養篩選,即得轉殖植株。
微量注入法 (microinjection)
此法於顯微鏡下,使用毛細管將外來基因直接注入生物細胞之原生質中,經組織培養, 即得轉殖植株。
上述幾種轉殖技術中,以農桿菌轉殖法與粒子槍導入法所得到的轉殖植株較穩定,且已 廣泛運用於植物之基因轉殖上。
https://www.tcdares.gov.tw/ws.php?id=1754
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