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學習重點 分清總鈣與游離鈣：OCPC、arsenazo III 比色法用於測定總鈣；離子選擇性電極（ISE）測定游離鈣，不能直接測定複合型鈣。 掌握血鈣呈色條件：OCPC 在鹼性反應環境形成紅色錯合物；arsenazo III 可在弱酸環境測定鈣。 記牢兩種遮蔽劑的方向：測鈣時以 8-hydroxyquinoline 遮蔽鎂；測鎂時以 EGTA 選擇性螯合鈣。 注意檢體品質：血鈣可使用適當肝素抗凝血漿；鈣、鎂測定應避免使用會螯合待測離子的抗凝劑，血鎂尤其須避免溶血。 認識鎂的分析方法：Calmagite 與鎂形成紅紫色產物；原子吸收光譜法（AAS）可作為鎂測定的參考方法。 核心觀念 一、鈣的吸收與調節 鈣主要經小腸吸收，活性維生素 D 可促進腸道吸收鈣。維生素 D 先在肝臟形成 25-hydroxyvitamin D，再經腎臟進行活化，生成 1,25-dihydroxyvitamin D，即 calcitriol。因此，腎臟是形成活性維生素 D 的重要器官。 骨骼是鈣的主要儲存場所，骨與血液之間的鈣交換，主要涉及副甲狀腺素、活性維生素 D 及降鈣素等調節。腎上腺皮質刺激素（ACTH）主要刺激腎上腺皮質分泌激素，不能將它列為直接調控骨鈣吸收與釋放的主要荷爾蒙。 二、總鈣、游離鈣與複合型鈣 血液中的鈣包括游離鈣、蛋白質結合鈣及與小分子陰離子結合的複合型鈣，三者合稱總鈣。複合型鈣可與檸檬酸根、磷酸根等結合，與游離鈣不同。 比較項目總鈣游離鈣 涵蓋範圍游離、蛋白質結合及複合型鈣的總和未與蛋白質或其他配體結合的鈣離子 常用測定方法OCPC、arsenazo III 比色法離子選擇性電極法（ISE） 判讀重點受白蛋白濃度影響為具有生理活性的重要形式，受檢體 pH 影響 ISE 偵測的是游離鈣的活度，不能直接測出複合型鈣。OCPC 測得總鈣，因此游離鈣也包含在測定結果中；「能測到游離鈣」不等於「只測游離鈣」。白蛋白降低時，總鈣可能降低，但游離鈣未必同步降低。 三、OCPC 法測定血鈣 o-cresolphthalein complexone又稱鄰甲酚酞錯合酮，常縮寫為 OCPC，亦可見 CPC 的寫法。此法用於血鈣測定：鈣在鹼性反應環境中與試劑形成紅色錯合物，再依吸光度求得總鈣濃度。 必須區分「呈色反應在鹼性條件進行」與「檢體測定前須先單獨鹼化」。前者是反應條件；後者不是一般 OCPC 法必備的獨立前處理步驟。通常由反應試劑提供適當的鹼性環境，依分析程序混合檢體與試劑即可。 鎂也可能參與呈色而干擾鈣的測定，因此加入8-hydroxyquinoline（8-羥基喹啉）遮蔽鎂，降低其干擾。此試劑的主要用途不是去除血脂、處理溶血，也不是去除待測的鈣。 四、Arsenazo III 法測定血鈣 Arsenazo III 法與 OCPC 法均可測定血鈣。Arsenazo III 可在弱酸環境下與鈣形成有色錯合物，利用吸光度測定總鈣。兩者的共同點是以呈色反應測鈣，差別之一是反應環境，不能把 OCPC 的鹼性條件套用到 arsenazo III。 五、血鎂呈色法與 EGTA 血清鎂可利用Calmagite呈色法測定。在適當的鹼性條件下，鎂與 Calmagite 形成紅紫色產物，其吸光度可用於求得鎂濃度。此類血清鎂呈色法測定的是總鎂，不是專一測定游離鎂。 鈣可能干擾鎂的呈色反應，因此加入EGTA（乙二醇雙胺乙基醚四乙酸）。EGTA 是螯合劑，在適當分析條件下對鈣的親和力遠高於鎂，可選擇性結合鈣，降低鈣對總鎂測定的干擾。 「選擇性螯合鈣」是指其相對選擇性，不宜背成 EGTA 在任何條件下都完全不結合鎂。就本單元的測定用途而言，應記住待測物是鎂、被遮蔽的干擾物是鈣；EGTA 不是用來去除檢體混濁、鈉離子或一般重金屬干擾。 測定項目呈色方法遮蔽劑主要遮蔽對象 總鈣OCPC8-hydroxyquinoline鎂 總鎂Calmagite 等呈色法EGTA鈣 六、檢體選擇與干擾 血鈣檢體：可使用血清或符合分析方法要求的肝素抗凝血漿。EDTA 會螯合鈣，不適合用於血鈣測定。 游離鈣檢體：使用肝素時須注意種類及用量，宜採適用於游離鈣測定的採血器材；肝素過量也可能影響結果。採檢與保存應避免造成 pH 改變。 血鎂檢體：可使用血清；若使用血漿，須依方法要求選擇抗凝劑。Sodium citrate（檸檬酸鈉）會螯合鎂，不適合用於血鎂測定，EDTA 等螯合型抗凝劑亦應避免。 避免溶血：紅血球內鎂濃度高於血清，溶血會釋出鎂，造成血鎂假性升高。遮蔽鈣的 EGTA 無法補救溶血造成的鎂增加。 原子吸收光譜法（AAS）可作為鎂測定的參考方法。作答時須分清：Calmagite 屬於呈色分析，AAS 則利用原子對特定波長光線的吸收進行測定。 常考陷阱 「ACTH 調控骨鈣吸收與釋放」：應想到副甲狀腺素與活性維生素 D 等主要鈣調節因子。 「ISE 測得複合型鈣」：錯在測定形式；ISE 測游離鈣。 「OCPC 只測游離鈣」：OCPC 測總鈣，游離鈣只是其中一部分。 「OCPC 檢體要先鹼化」：須區分反應條件與獨立前處理。OCPC 在鹼性環境呈色，不代表檢體必須預先單獨鹼化。 「8-hydroxyquinoline 去除血脂或輕微溶血干擾」：其在 OCPC 法中的主要作用是遮蔽鎂。 「EGTA 在測鎂時去除鎂」：方向相反；EGTA 用來遮蔽鈣，保留鎂參與呈色。 「Sodium citrate 適合血鎂測定」：檸檬酸鈉會螯合鎂，應避免使用。 「溶血使血鎂降低」：紅血球釋出鎂，通常使結果假性升高。 混淆呈色方法與條件：OCPC 是鹼性測鈣、形成紅色產物；arsenazo III 可在弱酸環境測鈣；Calmagite 測鎂、形成紅紫色產物。 記憶口訣 「鈣用 OCPC，鹼中紅；鎂用 Calmagite，紅紫呈。測鈣羥喹遮鎂，測鎂 EGTA 遮鈣；ISE 看游離，血鎂溶血高。」