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學習重點 測定酵素：血氨酵素法使用 glutamate dehydrogenase（GDH，麩胺酸脫氫酶），使氨與 α-ketoglutarate 反應形成 glutamate。 光學判讀：反應消耗還原型輔酶 NADPH，故測定的是 340 nm 吸光度減少；此方向的反應不產生 CO₂。 檢體前處理：肝素是可接受的抗凝劑；採血後應冰浴運送、迅速分離血漿並立即分析，避免放置造成假性高值。 升高因素：溶血、抽菸及處理延遲可使血氨測量值升高；肝衰竭則因氨的代謝清除能力下降而造成高血氨。 雷氏症候群：Reye’s syndrome 的重要血液變化為氨明顯增加。 核心觀念 一、血氨的來源與肝臟清除功能 氨來自含氮物質的代謝，例如胺基酸分解與腸道細菌代謝。生理條件下，肝臟可經由尿素循環將氨轉成尿素，再由腎臟排出。因此，血氨濃度取決於氨的生成量及身體清除氨的能力。 肝衰竭時血氨上升，主要是肝臟將氨轉成尿素的能力受損，氨因而累積。判讀時要區分病人體內真正的高血氨，以及採血後因溶血、延遲處理等因素造成的假性升高。 二、血氨酵素檢測法 本法使用的酵素為 glutamate dehydrogenase（GDH），催化 α-ketoglutarate（α-酮戊二酸）與銨離子反應，形成 glutamate（麩胺酸）。以使用 NADPH 的試劑為例，反應可簡示如下： α-ketoglutarate ＋ NH₄⁺ ＋ NADPH → glutamate ＋ NADP⁺ ＋ H₂O 反應進行時，NADPH 被氧化成 NADP⁺。由於 NADPH 在 340 nm 有明顯吸光，而 NADP⁺ 在此波長的吸光很低，因此測得的吸光度會隨反應進行而下降。在適當反應條件下，可由吸光度的減少量推算檢體中的氨濃度。 部分方法可使用 NADH，應依試劑設計判讀；共同原則都是還原型輔酶被消耗，340 nm 吸光度減少。不可將本法誤記為直接測量 glutamate 在 340 nm 的吸光度增加。 反應要素應掌握的內容 催化酵素Glutamate dehydrogenase，簡稱 GDH。 受測物檢體中的氨；反應式常以 NH₄⁺ 表示。 碳骨架來源α-ketoglutarate。 主要含氮產物Glutamate。 偵測訊號340 nm 吸光度下降。 是否產生 CO₂此測定方向不涉及脫羧，不產生 CO₂。 辨認酵素時要看完整名稱。Glutamate synthase、glutamate synthetase、glutamate peroxidase、glutamate transferase 與 glutamate isomerase，均不是此血氨測定反應所使用的 GDH。不能因名稱含有 glutamate，就認定為正確酵素。 三、檢體採集、分離與運送 血氨對前處理相當敏感。採血後，血球仍可能持續代謝並產生氨，若延遲分離或分析，測得結果可能高於病人體內實際濃度。因此，低溫與迅速處理必須同時做到。 使用適當抗凝劑：肝素可接受，但須使用符合檢驗要求的採血管；不可使用含銨鹽的抗凝劑，例如銨肝素，以免引入待測物。 避免溶血：採血與處理時應避免造成血球破裂，以減少假性升高的風險。 冰浴運送：採血後依血氨檢體要求置於冰浴，迅速送達檢驗室，降低採血後持續產氨的影響。 迅速分離並立即分析：應盡快將血漿與血球分開並完成測定；冰浴不能取代及時分析。 此單元的運送判斷重點是「冰浴運送並立即分析」。室溫儲存後依一般流程分析，或先放在 37℃，都不符合此原則；即使強調立即分析，也不能漏掉題目要求的冰浴條件。實際可接受的處理時限應依檢驗室及試劑規範，不宜套用單一數字。 四、造成血氨升高的因素 因素變化方向與判讀重點 溶血可使測得血氨假性升高，不能判為下降。 處理延遲或未適當降溫採血後持續產氨，可能造成假性高值。 抽菸可使血氨升高，採檢前應注意吸菸狀態，並避免煙霧污染。 肝衰竭氨轉成尿素的能力下降，造成體內血氨真正升高。 溶血時，血球內容物釋出會影響血氨測定。遇到溶血檢體，不應直接將高值解釋成病情惡化，也不能自行用固定數值校正；應依檢驗室規範評估是否重新採檢。 五、雷氏症候群與高血氨 雷氏症候群（Reye’s syndrome）具有急性腦病變與肝臟功能異常的特徵。肝臟粒線體功能障礙會影響尿素合成，使氨的清除能力降低，因而出現明顯高血氨。 在 ammonia（氨）、creatinine（肌酸酐）、creatine（肌酸）與 bilirubin（膽紅素）之間比較時，應掌握氨明顯增加這個典型關聯。不可因為涉及肝臟，就直接推論膽紅素一定增加最明顯；雷氏症候群的膽紅素可以不明顯升高。 常考陷阱 「產物是 glutamate，所以使用 glutamate synthetase」：不能由產物名稱猜酵素，應直接記住本法使用 GDH。 「340 nm 吸光度增加」：本法消耗 NADPH 或 NADH，故吸光度減少。判斷關鍵是還原型輔酶被消耗。 「反應產生 CO₂」：形成 glutamate 的測定方向沒有脫羧步驟，不產生 CO₂。 「溶血使血氨下降」：方向相反；溶血可造成假性升高。 「肝素不可用」：肝素是可接受的抗凝劑，但含銨鹽的製劑不適用。 「冰浴後可以延後分析」：冰浴只能減緩變化，仍須立即分析；室溫或 37℃ 放置也不符合本單元的運送原則。 「抽菸或肝衰竭使血氨下降」：兩者均應聯想到血氨升高，但其原因不同。 「雷氏症候群以肌酸酐、肌酸或膽紅素增加最明顯」：應優先聯想到 ammonia。 記憶口訣 「GDH 合麩胺，三四零往下看；冰浴速送立即驗，溶血抽菸氨會升；肝衰雷氏記高氨。」 將測定法串成一條線：GDH → 形成 glutamate → 消耗 NADPH → 340 nm 吸光度下降；將前處理記成一組：避免溶血、冰浴運送、迅速分離、立即分析。