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學習重點 先掌握細胞譜系標記：B 淋巴球以 CD19、CD20 為代表；T 淋巴球以 CD2、CD3 為代表，且 CD19、CD20 為陰性；NK 細胞以 CD56、CD16 為代表，且不表現表面 CD3 與 TCR。 區分檢驗工具的能力：全血細胞計數（CBC）與白血球分類只能得到淋巴球總數與比例，無法區分 T、B、NK 細胞；淋巴球亞群必須用流式細胞儀免疫分型，依抗原表現與散射訊號辨識。 熟記發育階段標記：CD19 從 B 淋巴母細胞一路表現到成熟 B 細胞，是涵蓋範圍最廣的 B 細胞標記；CD20 出現較晚，主要標記成熟 B 細胞；CD10 偏向早期前驅 B 細胞及生發中心 B 細胞；胸腺皮質的未成熟 T 細胞以 TdT+、CD4+CD8+ 雙陽性為主。 整合組織分布：正常成人周邊血 T 細胞多於 B 細胞（T 約占淋巴球 70%～80%）；骨髓則 B 細胞多於 T 細胞，且骨髓中的 CD8 T 細胞多於 CD4 T 細胞。 掌握功能差異：CD4+ T 細胞協助抗體產生及細胞性免疫；NK 細胞可毒殺 HLA class I 表現低的細胞，並可經 Fc 受體進行 ADCC；CAR-T 是改造後的 T 細胞，只具毒殺功能，不會分泌抗體。 核心觀念 一、T、B 與 NK 淋巴球的功能 T 細胞主要負責細胞性免疫。CD4+ 輔助型 T 細胞可藉由細胞激素及共刺激訊號，協助 B 細胞活化、增殖並分化為漿細胞以產生抗體，也可協助啟動細胞媒介性免疫（cell-mediated immunity）。CD8+ 細胞毒性 T 細胞可直接殺死受感染或異常的細胞。 B 細胞是抗體生成的核心。成熟 B 細胞受抗原活化後，可分化為漿細胞分泌抗體，也可形成記憶 B 細胞，再次遇到相同抗原時產生較快且較強的反應。 記憶細胞並非 B 細胞獨有。B 細胞與 T 細胞活化後皆可形成記憶細胞，因此「只有 B 細胞活化後會產生記憶細胞」是錯誤敘述。 自然殺手細胞（NK cell）屬於先天性淋巴球，不必事先經抗原致敏即可殺傷細胞，其毒殺機制有兩種： missing-self 機制：正常細胞表面的 HLA class I 會傳遞抑制訊號給 NK 細胞；病毒感染細胞或腫瘤細胞若 HLA class I 表現降低，抑制訊號消失，NK 細胞即會毒殺之。 ADCC（抗體依賴性細胞媒介毒殺）：目標細胞被 IgG 抗體結合後，抗體的 Fc 區域與 NK 細胞表面的 CD16（FcγRIII）結合，觸發毒殺反應。 NK 細胞不表現 TCR，也不表現表面 CD3，因此「NK 細胞同時表現 TCR 及 CD8」是錯誤的；部分 NK 細胞雖可弱表現 CD8，但不能據此判定為 T 細胞。 CAR-T 細胞是經基因工程改造的 T 細胞，表面嵌合抗原受體（chimeric antigen receptor）讓它能直接辨識腫瘤抗原，並以細胞毒殺機制攻擊腫瘤細胞。它是 T 細胞而非漿細胞，不具分泌抗體的功能，因此「同時具有分泌抗體及直接毒殺腫瘤細胞的功能」為錯誤敘述。 二、表面標記與發育階段 細胞類型重要表面標記判讀重點 B 淋巴系（淋巴母細胞至成熟 B 細胞）CD19CD19 從 B 淋巴母細胞到成熟 B 細胞皆明顯表現，是涵蓋範圍最廣、最可靠的 B 細胞譜系標記。 成熟 B 細胞CD19、CD20CD20 在發育較後期才出現，早期淋巴母細胞多不表現，主要用於辨識成熟 B 細胞。 早期前驅 B 細胞、生發中心 B 細胞CD10CD10 見於早期 B 淋巴母細胞，成熟周邊血 B 細胞已不表現，不能當作全程 B 細胞標記。 T 細胞CD2+、CD3+、CD19−、CD20−CD3 與 TCR 形成複合體，是 T 細胞最具代表性的標記；CD2 為全 T 細胞標記，但 NK 細胞也可表現。CD19、CD20 屬 B 細胞標記，T 細胞為陰性。 胸腺皮質未成熟 T 細胞TdT、CD4、CD8胸腺皮質細胞主要為 TdT+、CD4+CD8+ 雙陽性；移往髓質後 TdT 消失，成為 CD4 或 CD8 單陽性的成熟 T 細胞。 NK 細胞CD56、CD16（CD3−）位於 CD3 陰性的淋巴球群中；常見亞群為 CD56bright／CD16dim 與 CD56dim／CD16bright，後者為周邊血主要族群，毒殺力與 ADCC 能力較強。 判斷「何種標記存在於 B 淋巴系從 lymphoblast 到 mature lymphocyte 的全程」：選 CD19。CD20 太晚出現、CD10 成熟後消失、CD2 根本是 T／NK 細胞標記。 三、組織分布與數量關係 周邊血：正常成人淋巴球以 T 細胞占多數，約 T 細胞 70%～80%、B 細胞 10%～20%，其餘主要為 NK 細胞。周邊血 T 細胞中通常 CD4 多於 CD8。 骨髓：B 細胞的生成場所，正常骨髓中 B 細胞多於 T 細胞；骨髓中的 T 細胞則以 CD8 多於 CD4，與周邊血相反。 胸腺：T 細胞成熟與選擇的場所。皮質以 TdT+、CD4+CD8+ 雙陽性未成熟 T 細胞為主；髓質則為 TdT 陰性、單陽性的較成熟 T 細胞。 其他淋巴器官：B 細胞主要位於淋巴結濾泡及脾臟白髓的濾泡；T 細胞主要位於淋巴結旁皮質區及脾臟動脈周圍淋巴鞘。 部位T 與 B 的關係CD4 與 CD8 的關係 周邊血T 多於 BCD4 多於 CD8 骨髓B 多於 TCD8 多於 CD4 胸腺皮質以未成熟 T 細胞為主CD4+CD8+ 雙陽性、TdT+ 四、流式細胞儀如何辨識淋巴球亞群 周邊血檢體經溶解（去除）紅血球後，先以 CD45／側向散射（SS）圖圈選細胞群： 淋巴球：CD45 最強（bright）、SS 最低（顆粒最少）。 單核球：CD45 強、SS 中等。 嗜中性球（顆粒球）：CD45 較弱、SS 最高。 母細胞（blasts，包括 lymphoblasts）：CD45 弱（dim）、SS 低，位於淋巴球群左下方，並常表現 CD34、TdT 等未成熟標記。 圈選出淋巴球群後，再以兩兩抗原的散布圖細分亞群： CD3+ 的細胞群為 T 淋巴球，可再以 CD4、CD8 區分輔助型與細胞毒性 T 細胞。 CD19+（或 CD20+）、CD3− 的細胞群為 B 淋巴球。若此群來自 CD45 強、SS 低的淋巴球門，且無未成熟標記，應判為 B lymphocytes，而非 lymphoblasts。 CD3−，CD56+ 及／或 CD16+ 的細胞群為 NK 細胞。情況題中若圈出 CD3 陰性而 CD56 或 CD16 陽性的族群，答案即為 NK cells；單核球與嗜中性球已在 CD45／SS 階段被排除於淋巴球門之外。 判讀圖形時，先確認該 panel 使用的是哪一個細胞門（gate），再看圈選族群落在哪個抗原的陽性象限，最後與已知的免疫表型對照。 流式細胞儀可報告各亞群百分比，並結合淋巴球絕對數推算各亞群絕對計數，因此能直接看出正常成人周邊血 T 細胞多於 B 細胞。 五、其他容易混淆的基本性質 細胞大小：紅血球直徑約 7～8 μm；小淋巴球約 7～10 μm，與紅血球相近或略大；大淋巴球可達 12～15 μm。「淋巴球與紅血球相當，約 15 μm」是錯誤的，因為紅血球並不是 15 μm。 NAP 染色：NAP（neutrophil alkaline phosphatase，題目可能寫成 neutral alkaline phosphatase）用於評估嗜中性球，常用於鑑別慢性骨髓性白血病與類白血病反應，與淋巴球亞群無關，不能用來比較 B、T 細胞數量。 常考陷阱 「全血細胞計數／白血球分類可得知 T、B 細胞數目」：錯。這些檢驗只能得到淋巴球總數與比例，區分 T、B 細胞要靠流式細胞儀。 「NAP 染色可比較 B、T 細胞數量」：錯。NAP 是嗜中性球的酵素染色。 「周邊血 B 細胞多於 T 細胞」或「周邊血約 80% 淋巴球是 B 細胞」：錯。周邊血約 70%～80% 是 T 細胞。 「正常骨髓中 B 細胞比 T 細胞少」：錯。骨髓是 B 細胞多於 T 細胞。 「骨髓中的 CD8 T 細胞多於 CD4 T 細胞」：正確，不要被周邊血 CD4 較多的印象誤導而誤判為錯誤選項。 「胸腺皮質的 T 細胞主要是 TdT(+)」：正確。TdT 是未成熟淋巴球的標記，胸腺皮質正是未成熟 T 細胞聚集處。 「CD2 與 CD20 是 T 細胞的特異性抗原」：錯。CD20 是 B 細胞標記；CD2 雖見於 T 細胞，但 NK 細胞也有。 T 細胞表面抗原組合題：正確組合是 CD2+、CD3+、CD19−、CD20−。只要選項中 CD19 或 CD20 為陽性，或 CD3 為陰性，就不是 T 細胞。 B 淋巴系全程標記選 CD20 或 CD10：錯。CD20 出現較晚，CD10 成熟後消失；全程表現的是 CD19。 「只有 B 細胞會產生記憶細胞」：錯。T 細胞也會產生記憶細胞。 「NK 細胞表面同時表現 TCR 及 CD8」：錯。NK 細胞沒有 TCR，也是 CD3 陰性。 「NK 細胞會毒殺 HLA class I 表現低的細胞」、「NK 細胞可藉 ADCC 毒殺被抗體結合的細胞」、「NK 細胞可與抗體 Fc 區域結合進行毒殺」：皆正確，關鍵在 missing-self 與 CD16（Fc 受體）。 「CD4+ T 細胞協助 B 細胞產生抗體及協助細胞介導性免疫」：正確。 「CAR-T 細胞同時能分泌抗體及直接毒殺腫瘤」：錯。CAR-T 是 T 細胞，只會毒殺，不會分泌抗體。 流式圖判讀把 CD19+ 淋巴球誤判為 lymphoblasts：母細胞是 CD45 弱表現並帶未成熟標記；落在 CD45 強、SS 低的淋巴球門內且 CD19+ 的族群，應判為 B 淋巴球。 流式圖判讀把 CD3− 而 CD56／CD16+ 的族群誤判為單核球或嗜中性球：這些細胞若來自淋巴球門，就是 NK 細胞；單核球與嗜中性球的 SS 較高，不會落在淋巴球門內。 只憑 CD56 就判定 NK：部分 T 細胞也表現 CD56，NK 的判讀必須同時確認 CD3 陰性。 記憶口訣 「周血 T 多、骨髓 B 多；骨髓 T 裡 CD8 多。」 「T 看 2、3，B 看 19、20；19 從頭跟到尾，20 晚到、10 早退。」 「NK 三沒一有：沒 CD3、沒 TCR、不認 class I 就殺；有 CD16 抓抗體 Fc 做 ADCC。」 「胸腺皮質 TdT 雙陽；CAR-T 只殺不產抗體。」