阿摩線上測驗
登入
阿摩線上測驗
登入
學習重點 過氧化酶（peroxidase，PO／MPO）染色用於急性白血病的初步分型：骨髓系原始細胞通常呈陽性，淋巴系原始細胞呈陰性。若型態為原始細胞且 PO 陰性，初步診斷最可能是急性淋巴性白血病（ALL）。 非特異性酯酶（NSE）染色用來辨識單核系細胞，加入氟化鈉（sodium fluoride，NaF）後單核球的 NSE 活性會被抑制，可藉此確認被染細胞是單核球。 常見特殊染色的標的：Perls（普魯士藍）染鐵、PAS 染肝醣、Sudan black B 染脂質。 Sudan black B 的概括標的是「脂質」，若問「主要與何種物質反應」則選磷脂（phospholipid）。 核心觀念 一、PO 過氧化酶染色與急性白血病分型 過氧化酶染色屬於細胞化學染色。骨髓系細胞的初級（嗜苯胺藍）顆粒含有髓過氧化酶（myeloperoxidase，MPO），染色後細胞質出現有色顆粒。淋巴系細胞不含此酵素，因此呈陰性。 PO 陽性：支持急性骨髓性白血病（AML）。習慣上以原始細胞中陽性比例 ≥3% 作為判定骨髓系的依據。 PO 陰性：若型態為原始細胞（細胞核大、染色質細緻、細胞質少、無顆粒），最支持急性淋巴性白血病（ALL）。 題目若同時提供細胞型態與 PO 染色結果，先判斷「急性或慢性」，再判斷「骨髓系或淋巴系」。圖中為大量原始細胞，屬急性白血病。PO 染色的用途是區分急性白血病的系別，不用於診斷慢性骨髓性白血病（CML）或慢性淋巴性白血病（CLL）。CML 以各階段成熟顆粒球增生與 BCR-ABL1（Ph 染色體）為特徵，CLL 則以大量小型成熟淋巴球及 smudge cell 為特徵。 補充：單核母細胞（monoblast）的 PO 常為陰性或僅弱陽性，因此 PO 陰性時仍需搭配 NSE 等染色與流式細胞儀，排除單核系白血病。 二、NSE 非特異性酯酶與氟化鈉抑制試驗 NSE 染色常用 α-naphthyl acetate 或 α-naphthyl butyrate 作為受質，單核系細胞呈強陽性的瀰漫性反應。部分顆粒球、巨核細胞等也可能呈弱陽性，所以只看到陽性還不夠，必須加做氟化鈉抑制試驗。 加入 NaF 後，單核球的 NSE 活性被抑制，陽性反應消失，可確認為單核系。 顆粒球系細胞的酯酶活性不受 NaF 抑制。 顆粒球系另有特異性酯酶（specific esterase，即 naphthol AS-D chloroacetate esterase，CAE）呈陽性，單核球則呈陰性或弱陽性。 比較項目單核系顆粒球系 NSE（非特異性酯酶）強陽性陰性或弱陽性 加入 NaF被抑制不被抑制 CAE（特異性酯酶）陰性或弱陽性陽性 PO／Sudan black B陰性或弱陽性陽性 三、常見特殊染色的標的比較 染色法主要偵測標的判讀重點 PO 過氧化酶染色過氧化酶（MPO）活性骨髓系陽性，淋巴系陰性，用於急性白血病分型。 NSE 非特異性酯酶染色酯酶活性單核系陽性，可被 NaF 抑制。 Perls reaction（普魯士藍）鐵（三價鐵，含鐵血黃素）呈藍色顆粒，用於評估骨髓鐵儲存、鐵粒母細胞與環狀鐵粒母細胞。 PAS 染色肝醣（glycogen）等醣類物質ALL 原始細胞常呈塊狀（block）陽性。 Sudan black B 染色脂質，主要是磷脂結果與 PO 平行，骨髓系陽性，淋巴系陰性。 四、Perls reaction：偵測鐵 Perls reaction 即普魯士藍染色。細胞或組織中的三價鐵（Fe³⁺）與亞鐵氰化鉀在酸性環境中反應，生成藍色的亞鐵氰化鐵（普魯士藍），用來顯示含鐵血黃素等儲存鐵。血紅素中的鐵與血紅素緊密結合，不會被染出。臨床上常用於評估缺鐵性貧血（骨髓儲存鐵減少或消失）與鐵粒母細胞性貧血（可見環狀鐵粒母細胞）。 五、Sudan black B：脂質與磷脂 Sudan black B 是脂溶性染料，會溶入細胞內的脂質而使其著色，主要顯示脂質。它可以染磷脂、中性脂肪與固醇類，在血球中主要是與顆粒膜上的磷脂結合。 因此，「主要染脂質」是概括性答案，「主要和磷脂反應」則指出具體的反應成分，兩者並不矛盾。Sudan black B 不偵測鐵、醣類（肝醣、葡萄糖）、過氧化酶或鹼性磷酸酶。它在急性白血病分型的意義與 PO 相似：骨髓系陽性，淋巴系陰性。由於它不依賴酵素活性，即使抹片較舊仍可染色。 六、PAS 染色：肝醣 Periodic acid–Schiff（PAS）反應先以過碘酸氧化醣類，再由 Schiff 試劑呈現紫紅色，主要用來顯示肝醣（glycogen）。它是醣類染色，不是脂質染色，也不是鐵染色。 常考陷阱 原始細胞加上 PO 陰性，誤選 AML：PO 陰性代表沒有髓過氧化酶，最支持 ALL。 把急性白血病題選成慢性（CML、CLL）：先看型態是否為大量原始細胞。PO 是用來區分急性白血病系別的工具。 抑制劑選成 sodium chloride、potassium chloride、sodium bicarbonate 或 sodium citrate：能抑制單核球 NSE 的只有氟化鈉（NaF）。檸檬酸鈉是抗凝劑，與酯酶抑制無關。 認為 NSE 陽性就一定是單核球：確認單核球的關鍵是加入 NaF 後陽性反應被抑制。 把 Perls 選成 myeloperoxidase、glycogen 或 lipid：Perls 普魯士藍只染鐵。 Sudan black B 選成 glycogen、glucose 或 carbohydrate：醣類是 PAS 的標的。Sudan black B 染脂質。 Sudan black B 選成 peroxidase、alkaline phosphatase 或 iron：雖然 Sudan black B 的結果與 PO 平行，但它反應的是脂質（磷脂），不是酵素。 分清兩種問法：問「主要染何種物質」時選「lipid」，問「主要與何種物質反應」且選項有 phospholipid 時選「磷脂」。 記憶口訣 髓陽淋陰看 PO，蘇丹黑 B 跟著走；單核酯酶怕氟鈉；普藍找鐵、PAS 找醣、蘇丹找脂（磷脂）。