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學習重點 血清蛋白電泳原理：在 pH 8.6 的鹼性緩衝液中，環境 pH 高於多數血清蛋白及血色素的等電點，所以這些蛋白質帶淨負電，向陽極（＋）移動。 血清蛋白分區：由陽極端往陰極端依序為 albumin、α1-globulin、α2-globulin、β-globulin、γ-globulin。免疫球蛋白主要位於 γ-globulin 區。 M蛋白與單株疾病：多發性骨髓瘤、Waldenström 巨球蛋白血症、慢性淋巴性白血病、重鏈疾病及原發性（AL 型）澱粉樣變性都可能產生 M 蛋白。骨髓性腫瘤通常不會產生 M 蛋白。 M蛋白類別：多發性骨髓瘤以 IgG 最常見（約 60%），其次是 IgA。Waldenström 巨球蛋白血症的 M 蛋白為 IgM。 M蛋白鑑定與定量：SPEP 用來發現 M-spike 並計算濃度，公式為總蛋白 × 峰百分比。要確認重鏈與輕鏈類型，須使用免疫固定電泳。 核心觀念 一、蛋白質電泳的分離原理 蛋白質的等電點（pI）是指蛋白質所帶正、負電荷剛好相等、淨電荷為零時的 pH。帶電情形可依下列規則判斷： 環境 pH ＞ pI：蛋白質失去質子，帶淨負電，向陽極（＋）移動。 環境 pH ＜ pI：蛋白質帶淨正電，向陰極（－）移動。 環境 pH ＝ pI：淨電荷為零，在電場中不移動。 觀察項目判斷方式 電泳條件cellulose acetate 電泳常用 pH 8.6 的鹼性緩衝液。 多數血清蛋白pI 多低於 8.6，因此帶淨負電，向陽極遷移。 血色素pI 約在 7 左右，低於 8.6，因此帶淨負電，向陽極移動。血紅素電泳（如 HbA、HbS、HbC 的分離）就是利用這個條件。 遷移距離受淨電荷多寡、分子大小與形狀、支持介質等因素影響，不能單純視為分子量排序。 一個蛋白質分子上同時有帶正電與帶負電的基團，但電泳看的是整體淨電荷。在 pH 8.6 下，血色素整體為負電。 二、血清蛋白電泳的常見分區 分區（陽極 → 陰極）代表成分 Albumin白蛋白。含量最多，淨負電最多，遷移最快。 α1-globulinα1-antitrypsin、α1-acid glycoprotein 等 α2-globulinhaptoglobin、α2-macroglobulin、ceruloplasmin 等 β-globulintransferrin、補體 C3、β-lipoprotein 等 γ-globulin免疫球蛋白（抗體）。淨負電最少，遷移最慢，最靠近陰極。 抗體屬於免疫球蛋白，在血清蛋白電泳中主要出現在 γ-globulin 區。部分 IgA、IgM 或游離輕鏈可能延伸到 β 區，或落在 β 與 γ 之間。但題目問「免疫球蛋白出現在哪一區」時，答案是 γ-globulin。 三、單株與多株免疫球蛋白增加 M蛋白（monoclonal protein，又稱 paraprotein）是由單一 B 細胞或漿細胞克隆製造的免疫球蛋白或其片段，分子組成一致。它在 SPEP 上形成狹窄、尖銳的單一峰，稱為 M-spike。M 蛋白可以是完整的免疫球蛋白，也可以只是游離 κ 或 λ 輕鏈，或游離重鏈片段。 比較單株（monoclonal）多株（polyclonal） 來源單一 B 細胞／漿細胞克隆多個 B 細胞克隆對刺激產生反應 SPEP 形態窄而尖的單一峰γ 區寬廣、瀰漫性的隆起 代表情況多發性骨髓瘤、Waldenström 巨球蛋白血症感染（如感染性單核球增多症）、慢性發炎、肝病、自體免疫疾病 感染性單核球增多症是 EBV 感染引起的反應性變化，免疫球蛋白增加屬於多株性。急性淋巴性白血病的腫瘤細胞為不成熟的淋巴母細胞，通常不分泌免疫球蛋白。慢性骨髓性白血病屬於骨髓增生性腫瘤。因此，最容易出現單株抗體製造異常增加的是多發性骨髓瘤。 四、會與不會產生 M 蛋白的疾病 原則是：M 蛋白來自 B 細胞／漿細胞系的克隆性疾病。 會產生 M 蛋白特徵 多發性骨髓瘤漿細胞克隆增生。IgG 型最常見（約 60%），其次為 IgA，也可能為 IgD、IgE 或只有游離輕鏈。 Waldenström 巨球蛋白血症淋巴漿細胞性淋巴瘤分泌 IgM，可造成高黏滯症候群。 慢性淋巴性白血病屬於 B 細胞腫瘤，部分患者可出現單株免疫球蛋白。 重鏈疾病製造截短、不與輕鏈結合的游離重鏈片段（如 γ、α、μ 重鏈）。 原發性澱粉樣變性單株游離輕鏈沉積在組織中，形成 AL 型澱粉樣變性。 通常不產生 M 蛋白的疾病如下。這些疾病源自骨髓系幹細胞，不是 B 細胞或漿細胞： 急性髓性白血病（AML） 慢性骨髓性白血病（CML） 真性紅血球增多症（polycythemia vera） 原發性血小板增多症（essential thrombocythemia） 原發性骨髓纖維化（primary myelofibrosis） 骨髓增生不良症候群／refractory anemia 題目問「最不會出現 paraproteinemia」或「通常不會產生 M-protein」時，應選這一類疾病。 五、多發性骨髓瘤與 Waldenström 巨球蛋白血症的比較 疾病主要 M 蛋白判斷重點 多發性骨髓瘤IgG（約 60%）＞ IgA ＞ 游離輕鏈；IgD、IgE 少見IgM 型骨髓瘤非常罕見，不要和 Waldenström 混淆。 Waldenström 巨球蛋白血症IgM「macroglobulin」即五聚體 IgM，分子量大。 六、SPEP、免疫固定電泳與 M 蛋白濃度計算 血清蛋白電泳（SPEP）用來篩檢並發現 M-spike，也可用於定量。但單靠電泳位置，無法確定 M 蛋白是 IgG、IgA 或 IgM，也無法分辨是 κ 還是 λ 輕鏈。Albumin/globulin ratio 與 LDH 同樣無法分型。 免疫固定電泳（immunofixation electrophoresis, IFE）的做法是：先電泳，再以抗 IgG、抗 IgA、抗 IgM、抗 κ、抗 λ 等特異性抗血清分別使蛋白沉澱固定。這樣可以確認 M 蛋白的重鏈與輕鏈類型。臨床懷疑多發性骨髓瘤並需要確定腫瘤分泌哪一種免疫蛋白時，應安排 IFE。 M 蛋白濃度的計算方式如下： M蛋白濃度＝總蛋白濃度（total protein）× SPEP 中單一 paraprotein 峰所占百分比 例：總蛋白 12 g/dL，單一 paraprotein 峰占 46.2%。12 × 0.462＝5.544 g/dL 計算時先將百分比除以 100，所得單位與總蛋白相同。報告中的 albumin、globulin 或 IgG 數值都只是干擾資訊，不能代入公式。 常考陷阱 「pH 8.6 下血色素帶正電、不帶電，或部分正部分負」：錯。pH 8.6 高於血色素的 pI，血色素帶淨負電。判斷時看整體淨電荷，並比較環境 pH 與 pI。 電極方向弄反：帶負電的蛋白質向陽極（＋）移動，帶正電者向陰極（－）移動。 把免疫球蛋白答成 β-globulin 或 α 區：免疫球蛋白主要位於 γ-globulin 區。 把感染性單核球增多症當成單株抗體增加：感染造成的是多株性增加。單株抗體增加的代表疾病是多發性骨髓瘤。 把 CLL 當成「不會產生 M 蛋白」：CLL 屬於 B 細胞腫瘤，可以產生 M 蛋白。骨髓系疾病（AML、PV、ET、PMF、CML、refractory anemia）才是通常不會產生 M 蛋白的選項。 漏掉重鏈疾病與原發性澱粉樣變性：這兩者都屬於會產生 M 蛋白的疾病。重鏈疾病產生游離重鏈，AL 澱粉樣變性來自單株輕鏈。 多發性骨髓瘤答成 IgA 或 IgM：多發性骨髓瘤以 IgG 最多（約 60%），IgA 次之。IgM 是 Waldenström 巨球蛋白血症的類別。若選項要求依序作答「MM；WM」，應為「IgG；IgM」。 以為 SPEP 就能確定 IgG／IgA 或 κ／λ：SPEP 只負責發現與定量。分型要用免疫固定電泳。 計算時代錯數值：只能用 total protein 乘以峰百分比。不可用 globulin（8.7 × 46.2% ≈ 4.019）、albumin 或 IgG 值代入，否則會落入錯誤選項。 記憶口訣 「鹼性帶負往陽跑，抗體落在 γ 區；骨髓瘤 G、巨球 M；B 系才有 M 蛋白，骨髓系的通通無；定量 SPEP 乘總蛋白，定型要靠免疫固定。」