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學習重點 掌握透光凝集試驗的基本原理：血小板凝集後懸浮液混濁度下降、透光度上升，儀器連續記錄透光度變化，用來評估血小板對誘發劑的反應。 熟記檢驗時效：為避免血小板活化、耗竭及檢體劣化，血小板凝集試驗應於採血後至多 4 小時內完成。 分清兩個校正基準：病人 platelet-poor plasma（PPP）用來設定 100% 透光度；病人 platelet-rich plasma（PRP）用來設定 100% 凝集。兩者都要用病人自己的血漿，不用蒸餾水或緩衝液。 理解阿斯匹林的作用位置：阿斯匹林抑制環氧化酶（COX-1），使血栓素 A2（TXA2）無法生成，因此加入花生四烯酸（arachidonic acid）後凝集反應異常。 辨認影響因素：檸檬酸鈉濃度、血小板數目、誘發劑濃度、檢體保存條件與光學干擾都會影響結果；凝血因子活性不是本試驗的影響因素。 核心觀念 一、透光凝集試驗的原理與基本操作 透光凝集試驗（light transmission aggregometry, LTA）是光學式血小板功能檢查。富含血小板的血漿（PRP）在血小板分散時呈混濁，光線不易通過；加入誘發劑後，血小板彼此聚集成較大的凝集塊，懸浮液變得較澄清，透光度增加。儀器把透光度變化轉換成凝集曲線，用以判斷反應幅度、速度及是否可逆。 以檸檬酸鈉抗凝採血，低速離心取得 PRP，再將剩餘檢體高速離心取得 PPP。 以病人 PPP 與 PRP 分別作為儀器量尺兩端的校正基準。 將 PRP 置於 37°C 測定槽中攪拌，加入誘發劑，例如花生四烯酸、ADP、膠原蛋白、腎上腺素、凝血酶或 ristocetin。 判讀延遲時間、斜率、最大凝集百分比，以及是否出現二次凝集波或去凝集（disaggregation）。 本試驗評估的是血小板功能，與評估凝血串聯反應的凝血因子檢查是不同的檢驗。 二、100% 透光度與 100% 凝集的設定 校正材料 血小板狀態 光學特性 考試標準答案 病人 platelet-poor plasma（PPP） 幾乎不含血小板 最澄清，透光度最高 設定 100% 透光度 病人 platelet-rich plasma（PRP） 含大量分散的血小板 最混濁，透光度最低 設定 100% 凝集 判斷關鍵：問「透光度」就選沒有血小板、最透光的 PPP；問「凝集」就選含血小板的 PRP，因為凝集反應發生在 PRP 中。校正要用病人自己的血漿，因為血漿本身的顏色與濁度會影響透光。蒸餾水或緩衝液與病人血漿的光學性質不同，不能作為校正基準。 三、阿斯匹林對血小板凝集試驗的影響 阿斯匹林會不可逆地乙醯化並抑制血小板 COX-1，使花生四烯酸無法轉換成 TXA2。TXA2 會放大血小板的活化與凝集，生成受阻後，凡是依賴這條路徑的誘發劑反應都會下降。因為血小板沒有細胞核，無法再合成 COX-1，所以這種抑制會持續到血小板更新為止，約 7～10 天。 誘發劑 服用阿斯匹林後的典型反應 判讀重點 花生四烯酸（arachidonic acid） 凝集反應異常（明顯降低或消失） 最直接反映 COX-1／TXA2 路徑受抑制，是最具代表性的表現 膠原蛋白、腎上腺素、低濃度 ADP 反應減弱，腎上腺素、ADP 的二次凝集波可能消失 其作用部分依賴 TXA2 放大訊號 凝血酶（thrombin） 通常正常 經受體直接強力活化血小板，不依賴 TXA2 Ristocetin 通常正常 反映 vWF 與血小板 GPIb 的結合，不依賴 TXA2 所以服用阿斯匹林的病人並不是「完全不凝集」，也不是「只有加 ristocetin 才能凝集」或「加 thrombin 才異常」，典型表現是加入花生四烯酸後凝集反應異常。檢驗前應詢問並記錄阿斯匹林、NSAIDs 等抗血小板藥物的使用與停藥時間。 四、檢體採集、保存與時效 時效：採血後至多 4 小時內完成檢驗，放置過久會使血小板反應性下降、結果失真。 溫度：檢體保存於室溫，不可冷藏，因為低溫會活化血小板。 操作：採血要順暢，避免劇烈搖晃與反覆處理，以免血小板提前活化或凝集。 光學干擾：溶血、高脂血或黃疸會改變血漿的透光性，干擾基線與判讀。 五、影響凝集反應的因素 因素 是否影響 說明 抗凝固劑檸檬酸鈉的濃度 會 凝集需要鈣離子；檸檬酸鈉過多會使游離鈣過低而抑制凝集。血比容異常會改變抗凝劑與血漿的比例，也會造成影響。 血小板數目 會 數目過低會使凝集幅度偏低，可能被誤判為功能異常。 誘發凝集藥物的濃度 會 濃度不同，反應的強弱與曲線型態（例如二次波是否出現）也不同。 藥物、檢體時效、溫度、溶血或脂血 會 見前面各段說明。 凝血因子活性 不是 本試驗反映血小板功能，凝血因子活性應以 PT、aPTT 或凝血因子檢測評估。 常考陷阱 把 PPP 與 PRP 的用途對調：100% 透光度用 PPP（無血小板、最透光）；100% 凝集用 PRP。 選蒸餾水或緩衝液作為校正基準：校正必須使用病人自己的血漿，水與緩衝液都是錯誤選項。 把透光度方向看反：凝集發生時，懸浮液變澄清，透光度是上升。 以為阿斯匹林會「完全不凝集」：它只阻斷 TXA2 路徑，凝血酶與 ristocetin 的反應通常保留。 誤選「加 thrombin 後異常」或「只有 ristocetin 能凝集」：阿斯匹林的關鍵字是花生四烯酸與 COX／TXA2。 時效數字混淆：8、12、24 小時都太久，正確是4 小時內完成。 「何者不是影響因素」題型：檸檬酸鈉濃度、血小板數目、誘發劑濃度都會影響結果；凝血因子活性屬於凝血檢查的範疇，是正確答案。 以為檢體冷藏比較好：低溫會活化血小板，檢體應保存於室溫。 記憶口訣 「貧（PPP）透光、富（PRP）凝集」：貧血小板血漿最透明，設定 100% 透光；富血小板血漿用來設定 100% 凝集。 「阿斯匹林打 COX，花生四烯最先倒」：服用阿斯匹林，看花生四烯酸的反應。 「四小時、室溫放，凝血因子不算數」：採血後 4 小時內完成，檢體不冷藏，凝血因子不影響本試驗。