學習重點 蛋白質 S 檢驗不能只看總量:第一線篩檢應合併游離蛋白質 S 抗原量與蛋白質 S 活性(凝血功能),才能抓到總量接近正常的第三型缺乏。 蛋白質 S 與 C4b 結合蛋白(C4bBP)的關係:蛋白質 S 多數與 C4bBP 結合。具生理活性的主要是游離型,所以總量正常不代表功能正常。急性發炎時 C4bBP 增加,會使蛋白質 S 功能下降。 蛋白質 S 缺乏分型:依總量、游離量與活性判讀。第三型的特徵是總量接近正常,但游離量降低。 蛋白質 C 缺乏以活性檢測為第一線:抗原量正常時仍可能有質性缺陷。蛋白質 C 缺乏會削弱天然抗凝血作用,容易發生嚴重血栓。 蛋白質 C 活性測定使用蛇毒 Protac 活化:之後以發色受質法(amidolytic)或凝血時間法(anticoagulant/clotting)偵測,不使用 silica 活化。 核心觀念 一、蛋白質 S 的結合型態與檢驗意義 蛋白質 S(protein S)是蛋白質 C 路徑的重要輔因子。活化的蛋白質 C 在蛋白質 S 協助下,可使凝血因子 Va 與 VIIIa 失去活性,抑制凝血酶生成,因此具有抗凝血作用。 蛋白質 S 在血液中有兩種型態: 游離型,具有輔因子活性。 與 C4b 結合蛋白(C4b-binding protein;C4bBP)結合的型態,這部分幾乎不具輔因子活性。 檢驗項目 臨床意義 判讀重點 游離蛋白質 S 抗原量 反映可參與抗凝血作用的游離蛋白質 S 數量 第一線篩檢項目。第三型缺乏或急性發炎時會降低,即使總蛋白質 S 接近正常 蛋白質 S 活性(clotting function) 反映實際抗凝血功能 第一線篩檢項目。可偵測量的缺乏,也可偵測質性缺陷(第二型) 總蛋白質 S 抗原量 包含游離型及與 C4bBP 結合型 屬於分型用的輔助資料。總量正常不能排除缺乏,不適合作為第一線篩檢 C4bBP 影響游離蛋白質 S 比例的結合蛋白 不是蛋白質 S 缺乏的篩檢項目,用於解釋游離量下降的原因 懷疑栓塞病人有蛋白質 S 缺乏時,第一線篩檢是游離蛋白質 S 抗原加上蛋白質 S 凝血功能(活性)。異常時,再加做總蛋白質 S 抗原等項目進行分型。 二、蛋白質 S 缺乏的分型 類型 總蛋白質 S 游離蛋白質 S 蛋白質 S 活性 主要特徵 第一型:量的缺乏 降低 降低 降低 蛋白質 S 合成量減少,總量、游離量及活性同步下降 第二型:質性缺陷 正常 正常 降低 數量正常,但抗凝血功能異常。只驗抗原會漏掉,必須驗活性 第三型 接近正常 降低 降低 游離型比例下降,可伴隨 C4bBP 增加。基因變異與第一型類似,常被視為同一疾病的不同表現 第三型的辨識組合是:總蛋白質 S 接近正常、游離蛋白質 S 降低、活性降低,可伴隨 C4bBP 增加,且與第一型有類似的基因變異。若選項寫「第三型的游離蛋白質 S 接近正常」,就是不符合第三型的敘述。 三、急性發炎時蛋白質 S 功能降低 C4bBP 是急性期反應蛋白,在發炎、感染或壓力狀態下會增加。增加的 C4bBP 會結合更多蛋白質 S,使游離蛋白質 S 減少,蛋白質 S 功能因而降低。此時總蛋白質 S 可能仍接近正常,檢驗型態類似第三型。 急性發炎期蛋白質 S 功能下降,主要原因是 C4bBP 增加,不是肝功能損傷、腎功能損傷或蛋白質 C 活化。這種下降屬於暫時性、獲得性的變化,不能憑一次低值就診斷遺傳性缺乏,應待急性期過後再複驗。 其他常見的獲得性降低原因包括: 肝病 維生素 K 缺乏或使用 warfarin 懷孕 口服避孕藥 四、蛋白質 C 缺乏的機轉與血栓風險 蛋白質 C 是維生素 K 依賴性的天然抗凝血蛋白,作用步驟如下: 凝血酶與內皮細胞上的血栓調節蛋白(thrombomodulin)結合,將蛋白質 C 活化成活化蛋白質 C(APC)。 APC 在蛋白質 S 協助下,使 Va 與 VIIIa 失活。 凝血酶生成減少,形成負回饋的抗凝血作用。 蛋白質 C 缺乏時,這道煞車失效,凝血傾向增強,容易發生嚴重的血管栓塞,以靜脈血栓栓塞最典型。嚴重程度依缺乏程度而不同: 同型合子或嚴重缺乏者,可在新生兒期出現猛爆性紫斑(purpura fulminans)。 開始使用 warfarin 時,蛋白質 C 會先下降,可能引起皮膚壞死。 判斷「缺乏何者容易栓塞」時,要分清楚每個物質的生理角色: 物質 生理角色 異常與臨床後果 蛋白質 C 天然抗凝血因子 缺乏 → 抗凝血作用減弱 → 血栓 狼瘡性凝血抑制子(lupus anticoagulant) 抗磷脂抗體,屬於病理性產物 「存在」時與血栓相關,並使磷脂依賴性凝血試驗延長。正常人本來就沒有,談不上「缺乏」 胞漿素原活化抑制子(PAI-1) 抑制 t-PA,減緩纖維蛋白溶解 缺乏 → 纖溶過度 → 出血(常為延遲性出血),不是栓塞 第八凝血因子抗體 後天抑制物,屬於病理性產物 「存在」時造成出血(後天性血友病)。正常人本來就沒有 五、蛋白質 C 第一線篩檢與活性檢測方法 懷疑蛋白質 C 缺乏時,第一線篩檢為蛋白質 C 活性(function)檢驗。理由是蛋白質 C 缺乏分為兩型: 第一型為量的缺乏,抗原與活性都下降。 第二型為質性缺陷,抗原正常但活性下降。 活性檢測能同時偵測兩型,抗原定量則會漏掉第二型,因此抗原定量是活性降低後用來分型的檢查。 PT、reptilase time 都不是蛋白質 C 缺乏的篩檢工具,原因如下: 蛋白質 C 缺乏時,PT 通常正常。 Reptilase time 評估的是纖維蛋白原轉變成纖維蛋白的步驟。 另外,活化蛋白質 C 抵抗試驗(APC resistance)是篩檢 factor V Leiden 的檢查,不是篩檢蛋白質 C 缺乏。 蛋白質 C 活性測定先以蛇毒蛋白酶 Protac(來自 Agkistrodon contortrix 蛇毒)直接活化檢體中的蛋白質 C,再以下列任一方法偵測: 發色受質法(amidolytic / chromogenic assay):活化蛋白質 C 切割合成發色受質,以釋出的顏色量反映活性。 凝血時間法(anticoagulant / clotting assay):活化蛋白質 C 使 Va、VIIIa 失活,凝血時間(常以 APTT 為基礎)延長,延長程度反映活性。凝血法比較能偵測影響抗凝血功能的質性缺陷。 Silica 是 APTT 試劑中啟動接觸活化途徑的活化劑,不是用來活化蛋白質 C。若選項寫「使用 silica 活化 protein C」,即為錯誤敘述。 常考陷阱 選總蛋白質 S 抗原或 C4bBP 當第一線篩檢:第一線是游離蛋白質 S 抗原加上蛋白質 S 凝血功能。總量會漏掉第三型;C4bBP 不是篩檢項目。 誤以「總蛋白質 S 正常」排除缺乏:第三型的總量接近正常,但游離量與活性已降低。第二型的抗原量也正常,只有活性下降。 誤認為第三型的游離蛋白質 S 接近正常:游離量下降正是第三型的定義。「總量接近正常」「C4bBP 增加」「與第一型有類似基因變異」都符合第三型。 急性發炎期蛋白質 S 功能下降歸因於肝、腎功能或蛋白質 C 活化:主因是急性期蛋白 C4bBP 增加,結合掉游離蛋白質 S。 選蛋白質 C 抗原當第一線:抗原正常無法排除第二型質性缺陷,應先做活性檢驗。PT、reptilase time 都與蛋白質 C 篩檢無關。 「缺乏」與「存在」混淆: 狼瘡性凝血抑制子是「存在」時易栓塞。 第八因子抗體是「存在」時造成出血。 PAI-1「缺乏」時造成出血。 只有蛋白質 C「缺乏」時會造成嚴重栓塞。 誤記蛋白質 C 活性測定以 silica 活化:活化劑是蛇毒 Protac。Amidolytic 法與 anticoagulant 法都是正確的偵測方式,silica 是接觸途徑活化劑。 記憶口訣 「S 看游離加功能,總量正常別放行;發炎 C4b 升,游離被綁功能降。」 「三型游離低,總量騙你沒問題。」 「C 缺先驗活,抗原正常也會錯;蛇毒 Protac 來活化,色素凝血都能測,silica 不是 C 的伙。」 「缺 C 會栓、缺 PAI 會流血;LA 和八因子抗體,有了才出事。」