學習重點 凝血篩檢(PT、APTT)使用藍頭管,內含 3.2% 檸檬酸鈉(sodium citrate);血液與抗凝劑標準比例為 9:1。 血比容超過 55% 時應「減少」抗凝劑體積:高血比容代表血漿少,固定量的檸檬酸鈉相對過多,PT 與 APTT 兩者皆延長。 檢體品質影響結果:採血量不足、heparin 或 EDTA 污染、採血順序錯誤、從輸液手臂採血、檢體有血塊,都會使凝血時間偽延長。 時效與拒收:檢體最好在採血後 2~4 小時內完成檢驗,不宜 4℃ 冷藏。血量不足、溶血、嚴重脂血、凝塊要拒收;低血比容本身不是拒收條件。 核心觀念 一、抗凝劑與採血管 凝血檢驗最常用的抗凝劑是檸檬酸鈉(sodium citrate)。它會與鈣離子結合,使凝血反應暫停,而且這個作用可以在檢驗時加鈣逆轉。一般建議濃度為 3.2%(0.109 M),採血管為藍頭管。其他抗凝劑不適用的原因如下: 抗凝劑常見管色/用途為何不用於 PT、APTT Sodium citrate 3.2%藍頭管,凝血檢驗為標準抗凝劑 EDTA紫頭管,血球計數螯合鈣的能力過強,且會影響凝血因子(尤其 FV、FVIII) Heparin綠頭管,生化檢驗透過 antithrombin 直接抑制凝血酵素,會使凝血時間延長 Sodium fluoride灰頭管,血糖檢驗用途是抑制糖解作用,與凝血檢驗無關 標準比例為血液 9 份:抗凝劑 1 份,例如血液 4.5 mL 配檸檬酸鈉 0.5 mL。採血要採到刻度,採完立即輕柔顛倒混合數次,不可劇烈搖晃,以免溶血或活化。 採血量不足時抗凝劑相對過多。多餘的檸檬酸鈉會與檢驗時加入的鈣結合,使 PT 與 APTT 延長,這類檢體應拒收。 二、血比容與抗凝劑校正 檸檬酸鈉只分布在血漿中,所以真正影響結果的是抗凝劑與「血漿」的比例: 血比容高(>55%,例如 polycythemia):同樣的血量中血漿較少,固定 0.5 mL 的檸檬酸鈉相對過多。檢驗時加入的鈣會被多餘的檸檬酸鈉結合,導致 PT 與 APTT 皆延長。 處理方式:減少抗凝劑體積(或依比例調整),使抗凝劑與血漿維持正確比例。不能改用 heparin,也不是減少血液量。 常用校正公式: 檸檬酸鈉體積(mL)= 0.00185 × 血液體積(mL)×(100 − Hct%) 例:血液 4.5 mL,Hct 70% 時,0.00185 × 4.5 × 30 ≈ 0.25 mL,比一般的 0.5 mL 少,因此要把試管中多餘的抗凝劑移除。 血比容抗凝劑相對量未校正時的 PT/APTT處理 正常(約 35~55%)適當正常標準 9:1 >55%(如 60%、70%、polycythemia)相對過多兩者皆延長減少抗凝劑體積 低(如貧血、Hct 25%)相對略少不會造成延長,影響輕微一般不需拒收 因此「貧血、hematocrit 過低」不是 PT 延長的原因,「血比容 25%」也不是 APTT 偽延長的原因。 三、採血順序與污染 建議採血順序:血液培養瓶 → 藍頭(citrate) → 紅/黃頭(serum)→ 綠頭(heparin) → 紫頭(EDTA)→ 灰頭(fluoride)。 下列情況會造成 PT、APTT 偽延長: 藍頭管排在綠頭管之後:前一管的 heparin 經針頭帶入藍頭管。 從 heparin 沖洗過的靜脈導管採血:heparin 混入檢體。 EDTA 污染:EDTA 結合鈣,並破壞凝血因子。 從正在輸注點滴的同一手臂採血:檢體被稀釋,或混入藥物。 檢體有血塊:凝血因子在試管中被消耗。 四、離心、保存時效與試劑 離心:約 2000 × g 離心 10 分鐘,取上層血漿,目標是得到乏血小板血漿(platelet-poor plasma)。 容器:使用塑膠(或矽化玻璃)試管。一般玻璃會活化接觸因子。 時效:最好在採血後 2~4 小時內完成檢驗,期間以室溫保存。 不宜 4℃ 冷藏:低溫會活化 FVII(cold activation),也會使 FVIII、vWF 下降。「4℃ 保存、24 小時內完成」是錯誤敘述。 無法及時檢驗時:分離血漿後冷凍保存,並避免反覆凍融。 鈣液:凝血試驗用來重新鈣化的 CaCl₂ 濃度為 0.025 M。 五、檢體拒收標準 血量不足(未達刻度,比例錯誤) 檢體凝固或有血塊 溶血 嚴重脂血(干擾光學偵測) 管別錯誤、標示不符、超過檢驗時效 血比容低於 25% 不屬於拒收標準。 常考陷阱 濃度混淆:選項常出現 2.2%、2.3%、2.7%、3.7%、3.8%,正確答案是 3.2%。另外 3.2 M、3.8 M 是拿檸檬酸鈉的百分比冒充鈣液濃度,鈣液應為 0.025 M,不是 0.25 M。 高血比容「增加」抗凝劑:這是錯的。血漿變少,抗凝劑應減少。也不是減少血液體積或改用 heparin。 高血比容「只延長一項」或「PT 縮短」:錯。未校正時 PT 與 APTT 皆延長,polycythemia 的結果相同。 把貧血、低血比容當成延長原因或拒收條件:錯。偽延長要從採血量不足、heparin/EDTA 污染、採血順序、輸液手臂、血塊這幾項中找。 「4℃ 可保存 24 小時」:錯。凝血檢體不宜冷藏,最好 2~4 小時內完成。 採血順序:藍頭管應在綠頭管之前。放在後面會受到 heparin 污染,使結果延長。 記憶口訣 藍管檸檬三點二,血九抗一要採滿。 血比過五五,血漿變少抗凝減;不減兩項都延長。 貧血不延長也不退;量少、血塊、溶脂才退件。 藍先綠後防肝素;二到四時要做完,不進冰箱;鈣液零點零二五。