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學習重點 蛋白酶（papain、ficin、bromelin）的作用有兩種：Rh、Kidd、Lewis、P、I等系統的反應會增強；MNS（M、N、S、s）與Duffy（Fya、Fyb）抗原會被破壞；Kell抗原不受一般蛋白酶影響。 DTT／AET等硫還原劑：處理血清時可破壞IgM，不會破壞IgG；處理紅血球時會破壞含雙硫鍵的抗原，最典型的是Kell系統，其次是Lutheran（如Lub）等。 Chloroquine可去除紅血球上的IgG，但不移除補體；ZZAP則是DTT加蛋白酶的混合試劑。 Anti-CD38單株抗體（如daratumumab）會干擾抗體篩檢與交叉試驗，所以要在用藥前建立血型基準資料。用藥後可用DTT處理試劑紅血球來排除干擾。 核心觀念 一、蛋白酶處理對紅血球抗原的影響 Papain、ficin、bromelin等蛋白酶有兩種作用： 降低表面負電荷：蛋白酶會切除紅血球表面帶唾液酸的醣蛋白，使表面負電荷（zeta potential）下降。紅血球因此較容易互相靠近，抗原位置較深或抗原量較少的系統，反應會增強。 直接破壞抗原：位於醣蛋白被切除片段上的抗原會一併被切掉。這類抗原不論對應抗體是IgM或IgG，反應都會減弱或消失。 酵素處理後的變化血型系統／抗原補充 反應增強Rh、Kidd、Lewis、P（P1）、I、ABOKidd抗體常微弱且易漏驗，常用酵素法提高偵測率 被破壞（反應變弱或消失）MNS（M、N、S、s）、Duffy（Fya、Fyb）M、N最敏感；S、s也列為會被破壞的抗原 大致不受影響KellKell不怕酵素，但會被DTT破壞 判讀抗體篩檢細胞經酵素處理後的反應時，先看該細胞帶有哪些抗原，再依上表判斷： anti-D、anti-E、anti-Jka：反應增強。 anti-M、anti-Fya：反應減弱或消失。 二、常考抗體的特性辨識 Anti-Fya：常為IgG，是具臨床意義的溫型抗體，可引起溶血性輸血反應及新生兒溶血。Fya抗原會被ficin、papain破壞，因此不與酵素處理過的紅血球反應。 Anti-Jka：同樣是具臨床意義的溫型抗體，但Kidd抗原經酵素處理後反應增強，所以不符合「不與酵素處理紅血球反應」的條件。 Anti-M：多為IgM、冷型，臨床意義通常較低；M抗原會被酵素破壞。 Anti-Lea：常為IgM，可在活體外活化補體，甚至造成體外溶血；Lewis抗原經酵素處理後反應增強。三項條件全部符合，是此類題型的典型答案。 Anti-K：常為IgG，可引起嚴重新生兒溶血及溶血性輸血反應（含延遲性）。Kell抗原會被DTT破壞。 Anti-E：雖然也是IgG，也能引起新生兒溶血或延遲性溶血，但Rh抗原不會被DTT破壞。 三、DTT與其他硫還原劑（AET） DTT、AET（2-aminoethylisothiouronium bromide）能還原雙硫鍵。題目要先分清楚處理的對象是「血清」還是「紅血球」。 處理對象作用注意 血清（抗體）打斷IgM五聚體的雙硫鍵，使IgM失去凝集與活化補體的能力IgG不會被破壞，可藉此區分抗體是IgM或IgG 紅血球（抗原）破壞含雙硫鍵結構的抗原：Kell系統（K、k、Kpa、Kpb、Js等）、Lutheran（如Lub）等Duffy、MNS、Rh、Kidd不會被DTT破壞 DTT與蛋白酶的作用正好互補，可對照記憶： 蛋白酶：破壞Duffy、MNS，不破壞Kell。 DTT：破壞Kell，不破壞Duffy、MNS。 四、唾液酸苷酶與其他特殊試劑 Neuraminidase（唾液酸苷酶）：只切除唾液酸，不切蛋白質。 M、N抗原的表現與唾液酸有關，因此MNS抗原會被破壞。 Duffy抗原不會被neuraminidase破壞（Duffy是被蛋白酶破壞）。 Tn抗原不會被它破壞；去除唾液酸反而會暴露隱藏抗原（如T抗原）。 它不是用來加強Rh、Kidd的試劑。 Chloroquine diphosphate：可將紅血球表面結合的IgG解離下來，但不會移除補體（C3）。常用於DAT陽性的紅血球，去除IgG後再做血型抗原鑑定。 ZZAP：DTT加蛋白酶（papain或ficin）的混合試劑。 可解離紅血球上的IgG，常用於自體吸附。 同時具有兩者的破壞作用：Kell（DTT）與MNS、Duffy（酵素）都會被破壞。 五、Anti-CD38單株抗體對輸血前檢驗的干擾 多發性骨髓瘤的治療藥物daratumumab屬於IgG類Anti-CD38單株抗體。紅血球表面也有少量CD38，藥物會與試劑紅血球上的CD38結合，造成以下干擾： 間接抗球蛋白試驗（抗體篩檢、抗體鑑定、交叉試驗）幾乎所有細胞都呈弱陽性（panreactivity）。 DAT也可能陽性。 這些反應容易掩蓋或被誤認為同種抗體。 ABO、RhD的血型鑑定一般不受影響。 停藥後干擾仍可能持續數個月。 其他骨髓瘤藥物，如proteasome inhibitors、immunomodulatory drugs、corticosteroids，不會造成這類血清學干擾。 用藥前建立基準資料：完成ABO／RhD鑑定、抗體篩檢，必要時加做延伸表型（Rh、Kell、Kidd、Duffy、MNS等）或基因型鑑定。 用藥後用DTT處理試劑紅血球：DTT會使紅血球上的CD38變性，藥物便無法結合，可排除干擾並偵測其他同種抗體。 DTT處理的副作用：Kell抗原也會被破壞，所以無法偵測anti-K。輸血時通常選K陰性血品，除非已知病患為K陽性。 通知血庫：臨床端應主動告知用藥史，血庫判讀時不可把全凝集直接當成自體或同種抗體。 常考陷阱 「bromelin可增強Duffy」是錯的：蛋白酶增強的是Rh、Kidd、Lewis、P；Duffy、MNS是被破壞。 P、Lewis和MNS互換：問「酵素處理後反應變弱」要選MNS；問「反應加強」要選Lewis（或Rh、Kidd、P），不是Jka以外的Fya、K。 把Kell列入酵素破壞的抗原：Kell不怕酵素，怕DTT／AET。酵素破壞的是Duffy、MN、Ss。 「DTT可以破壞IgG」是錯的：DTT破壞的是IgM；處理紅血球時破壞的是K、Lub等抗原。 「Chloroquine會移除補體」是錯的：chloroquine只移除IgG，補體仍留在紅血球上。 只看部分條件選Anti-E或Anti-Jka：多條件題要逐項核對。 「IgG＋溶血＋DTT破壞」：只有anti-K符合。 「溫型、具臨床意義＋不與ficin細胞反應」：只有anti-Fya符合。 唾液酸苷酶破壞的是MNS：它不破壞Duffy與Tn，也不是用來加強Rh、Kidd的試劑。 以為DTT無法排除daratumumab干擾：DTT處理試劑紅血球正是標準處理方式，但要記得同時失去Kell的偵測能力。 把所有骨髓瘤藥物都當成會干擾備血：需要事先建立血型資料的是Anti-CD38單株抗體。 記憶口訣 「酵素增強：Rh、Kidd、Lewis、P；酵素切掉：M、N、S、Duffy。」 「DTT打Kell、Lu，殺IgM不殺IgG；Chloroquine帶走IgG、留下補體；ZZAP＝DTT＋酵素。」 「Dara用藥前先定型，用藥後細胞泡DTT，輸血記得K陰性。」