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學習重點 正定型與反定型必須互相吻合：正定型（cell typing）以抗A、抗B（必要時加抗A,B）血清檢測紅血球抗原，陽性通常為3＋～4＋。反定型（serum typing）以A1細胞、B細胞檢測血清抗體，常加做O細胞與自體對照。 不一致時先找「哪一邊比預期弱、哪一邊多出反應」：抗原弱或缺，想ABO亞型、白血病、移植或輸血。抗體弱或缺，想新生兒、老人、免疫低下。多出抗原，想後天獲致B、cis-AB、試劑染料抗體。多出抗體，想抗A1、非ABO異體抗體、自體冷抗體、緡錢狀反應、孟買血型。 O細胞與自體對照是鑑別多出反應的關鍵：O細胞陽性代表有非ABO的反應。再看自體對照：陰性指向異體抗體或孟買血型的抗H，陽性指向自體冷抗體或緡錢狀反應。 後天獲致B的典型組合：A型病人加上腸阻塞、腸道感染或Gram陰性菌血症。抗A強陽性、抗B弱陽性，反定型只有B細胞強陽性，唾液沒有B物質。 混合視野（mf）代表兩群紅血球：見於A3、B3、Aend、近期輸不同血型紅血球、不同血型幹細胞或骨髓移植。Am不呈混合視野。 核心觀念 一、凝集強度與判讀原則 正定型使用高效價單株抗體，正常陽性為3＋～4＋。若只有W＋～2＋，即屬「比預期弱」，應追查亞型、疾病或兩群紅血球。反定型的天然抗體反應通常較正定型弱，但A1或B細胞反應突然消失仍屬異常。結果出現混合凝集時應記錄為mf，代表同時存在會凝集與不會凝集的兩群細胞，與單純「整體弱陽性」不同。 正反定型不一致時，不可直接報告血型。應先排除技術錯誤，例如檢體錯誤、試劑、細胞懸液濃度、離心、判讀，再依下表鑑別，必要時以O型紅血球、AB型血漿輸血。 典型結果最可能原因 抗A 4＋、抗B 弱陽性（1＋～2＋）；A1細胞 0、B細胞 4＋、O細胞 0A型（A1）病人發生後天獲致B 抗A 0、抗B 0；A1細胞＋、B細胞＋、O細胞＋（強）；自體對照 0孟買血型（Oh）：血清有抗A、抗B、抗H 抗A 4＋、抗B 0；A1細胞＋、B細胞 4＋、O細胞＋；自體對照 0A型，具ABO以外的異體抗體（多為冷反應性，如抗M、抗P1、抗Lea等） 抗A 4＋、抗B 0；A1細胞＋、B細胞 4＋、O細胞 0、A2細胞 0A亞型（如A2）具抗A1，屬ABO系統內的抗體 反定型A1、B、O細胞均有凝集，自體對照＋（多為弱）自體冷抗體（如抗I） 反定型各細胞與自體對照普遍凝集，顯微鏡下呈疊錢狀；加生理食鹽水可分散緡錢狀反應（多發性骨髓瘤、巨球蛋白血症等高蛋白） 某一抗血清呈 mfA3／B3／Aend亞型、近期輸血、不同血型幹細胞／骨髓移植 二、抗體減弱或消失（反定型缺少應有的凝集） 抗原正常而反定型缺少預期抗體，常見於下列對象： 新生兒及4～6個月以下嬰兒：自身ABO抗體尚未產生，血清中的抗體多來自母親經胎盤傳來的IgG。因此新生兒只做正定型，反定型結果不作為判定依據。例如新生兒抗A（－）、抗B（－），即判為O型。此時A1細胞（＋）、B細胞（－）只反映母親的抗A被動轉移，不可解讀為「缺少抗A所以不是O型」。 老年人：抗體效價隨年齡下降。 免疫低下或抗體製造不足者：低／無γ球蛋白血症、慢性淋巴性白血病、接受免疫抑制治療者。 骨髓移植後：受者原有抗體會逐漸改變或消失。 處理方式為延長室溫或4°C反應時間以增強弱抗體，並結合年齡、病史判讀。 三、抗原減弱或缺失（正定型比預期弱） ABO亞型是最常見原因。各亞型與抗A的反應特徵如下： 亞型與抗A的反應特徵 A2抗A強陽性，不與抗A1凝集素（Dolichos biflorus）反應；部分人血清有抗A1，使反定型A1細胞陽性 A3混合視野（mf），兩群細胞 Ax與抗A弱或不反應，與抗A,B可凝集，血清常有抗A1 Aend僅極少數細胞凝集，呈弱的mf Am與抗A、抗A,B幾乎不凝集，無混合視野；需吸附沖提法證明A抗原，分泌型唾液有A物質 B亞型同理，B3也以抗B呈mf為特徵。 疾病造成抗原減弱：白血病（尤其AML）、Hodgkin’s lymphoma等血液惡性腫瘤可使A、B抗原表現減弱，造成正反定型不符。 兩群紅血球造成mf：近期輸入不同ABO血型紅血球（如A型病人輸O型血）、接受不同血型的幹細胞或骨髓移植，都會使受者與供者紅血球共存。移植成功後，紅血球血型轉為供者型，但血清抗體可能仍為受者型，同樣造成正反不符。 A2型的抗A1影響的是反定型（A1細胞陽性），不會使正定型的抗B出現mf，兩者不可混為一談。 相對地，急性B型肝炎並不改變ABO抗原或抗體，不是ABO正反定型不一致的原因。 四、後天獲致B（acquired B） 機轉：腸阻塞、大腸直腸癌、腸道感染、Gram陰性菌（如E. coli、Proteus）或Clostridium菌血症時，細菌的去乙醯酶作用於A抗原。A抗原的N-乙醯半乳糖胺（GalNAc）去乙醯基後成為半乳糖胺，結構類似B抗原的半乳糖，因此被部分抗B試劑辨認。另有細菌B樣多醣吸附於紅血球的機轉。去乙醯化需有A抗原，故最典型為A1型病人。教科書與考題亦將腸阻塞、菌血症相關的後天獲致B描述延伸至O型病人，此類敘述視為合理。 檢驗特徵： 正定型：抗A 4＋、抗B弱陽性（1＋～2＋，可呈mf）、抗A,B 4＋。 反定型：A1細胞（0）、B細胞強陽性（病人自身有抗B）、O細胞（0）。 自體對照陰性：病人的抗B不凝集自己的「獲得性B」細胞。 唾液中無B物質：病人沒有B基因與B轉移酶，分泌型者唾液只有A與H物質。 酸化（pH 6.0）的抗B試劑不反應。 屬暫時性變化，感染或原發疾病緩解後消失。 與A1B、A2B的鑑別：真正AB型血清無抗B，B細胞應為陰性。若反定型B細胞4＋，就不是AB型，而應判為A型加上後天獲致B。高蛋白造成的干擾則會使O細胞也陽性，與此組合不符。 五、其他造成「多出抗原」的情況 cis-AB：A與B轉移酶活性來自同一條染色體上的單一等位基因。B抗原通常較弱，血清常含弱抗B。因此可出現抗A＋、抗B＋，反定型B細胞＋、A1細胞0、O細胞0，抗體篩檢陰性。需以家族調查或基因分型確認。 試劑染料抗體：部分抗B試劑以黃色染料acriflavine著色。病人若有抗acriflavine抗體，其紅血球在抗B試劑中會凝集，造成偽陽性B。改用其他廠牌試劑或洗滌紅血球即可鑑別。 六、造成「多出抗體／反應」的情況 抗A1：見於A2、A2B或其他A亞型病人。反定型A1細胞陽性、O細胞陰性、A2細胞陰性。正定型可加做抗A1凝集素確認。 非ABO異體抗體：反定型A1、B、O細胞都可能被凝集，關鍵是O細胞陽性、自體對照陰性，且抗體篩檢陽性。應鑑定抗體特異性，再以缺乏該抗原的A1、B細胞重做反定型。 自體冷抗體（cold agglutinin）：如抗I，室溫或低溫下凝集所有成人紅血球。表現為A1、B、O細胞與自體對照皆陽性，正定型也可能出現自發凝集。處理方式為37°C溫洗紅血球、預溫法或冷自體吸附。冷凝抗體確實會造成ABO正反定型不一致。 緡錢狀反應：多發性骨髓瘤、Waldenström巨球蛋白血症、高纖維蛋白原或注射高分子擴容劑時，血清蛋白異常使細胞呈疊錢狀聚集。反定型各細胞（含O細胞）與自體對照普遍陽性，抗體篩檢也會陽性。生理食鹽水置換法可使其分散。 七、孟買血型（Oh） 孟買血型為hh且非分泌型（sese），紅血球缺乏H抗原，因此也無法形成A、B抗原。正定型抗A、抗B、抗A,B皆陰性，與抗H凝集素（Ulex europaeus）也不反應。血清含抗A、抗B及強力抗H，所以反定型A1、B、O細胞全部強陽性，自體對照陰性。抗H在37°C具溶血性，必須輸注孟買血型血液。 常考陷阱 「後天獲致B者唾液有B抗原」是錯的：B樣抗原是細菌改造紅血球表面A抗原的結果，並非B基因產物，唾液沒有B物質。「A抗原去乙醯化」「菌血症」「腸阻塞」都是正確敘述。 抗B弱陽性加上B細胞強陽性，不可判為A1B或A2B：AB型血清不可能有抗B。看到抗A 4＋、抗B 1＋～2＋、A1細胞0、B細胞4＋、O細胞0，答後天獲致B。 「不可能是冷凝抗體造成」是錯的：自體冷抗體是正反定型不一致的常見原因，特徵是自體對照陽性。 O細胞陽性要分清楚：自體對照陰性時為非ABO異體抗體，若正定型全陰則為孟買。自體對照陽性時為自體冷抗體或緡錢狀反應。ABO系統的抗體（如抗A1）不會凝集O細胞，所以O細胞陽性時，選項「有ABO的異體抗體」不成立。 B細胞弱陽性、O細胞弱陽性、自體對照陽性，而正定型為B型：這是B型病人加上自體冷抗體，不是弱亞型或抗A1。抗A1不會讓O細胞及自體對照陽性，孟買血型則正定型抗B應為陰性。 抗體篩檢陰性、O細胞陰性的不一致不可能是多發性骨髓瘤：緡錢狀反應會讓O細胞、抗體篩檢及自體對照普遍陽性。cis-AB、抗acriflavine抗體、後天獲致B則都可能出現此模式。 Am不出現mf：A3、Aend、B3及輸血或移植後的兩群細胞才是mf。 抗B呈mf不能用A2加抗A1解釋：抗A1只影響反定型的A1細胞。抗B呈mf應想B3、輸血或移植。 正定型陽性應為3＋～4＋：W＋～2＋屬比預期弱，是需追查的異常。 新生兒依正定型判定：反定型出現的抗體多為母親被動轉移，不據以判型。 非原因的干擾選項：急性B型肝炎等一般感染不會造成ABO不符。白血病、Hodgkin’s lymphoma、骨髓移植、Clostridium菌血症則會。 孟買血型的O細胞是陽性：因血清有抗H，且紅血球無H抗原，與一般O型（O細胞陰性）不同。 記憶口訣 「正向三四才算數；抗B弱、B細胞強，A1腸阻後天B，唾液無B莫上當。」 「O細胞一陽看自體：自體陰是異體抗，正向全陰是孟買；自體陽是冷抗體，疊錢加鹽就散開。」 「混合視野三與end，輸血移植兩群細胞；Am沒有mf，吸附沖提才現身。」