學習重點 乳糜微粒認 apo B-48:apo B-48 是乳糜微粒的主要結構性載脂蛋白,也是形成乳糜微粒所必需的成分。 含 apo B-100 的脂蛋白:VLDL、IDL、LDL 與 Lp(a) 均含 apo B-100;一般脂質代謝中的 HDL 不含 apo B-100。 HDL 認 apo A-I、apo A-II:apo A-I 是 HDL 的主要載脂蛋白,可用來大概估算 HDL 含量;apo A-II 也主要存在於 HDL。 分子量先比較大小:apo B-100 大於 apo B-48;apo B-48 又明顯大於 apo E、apo C-I 與 apo C-III。 免疫測定認 Tween 20:其作用是破壞或鬆動蛋白質與脂質的結合,使抗原表位容易被抗體辨識。 核心觀念 一、載脂蛋白與脂蛋白的關係 脂蛋白是由脂質與載脂蛋白組成的顆粒。載脂蛋白又稱脂蛋白元,英文為 apolipoprotein,簡稱 apo,具有維持顆粒結構、參與受體辨識或調節脂質代謝酵素等作用。脂蛋白名稱與載脂蛋白名稱不可混用:LDL、HDL 是顆粒;apo B-100、apo A-I 則是顆粒上的蛋白質。 判讀組成時,應區分主要結構性成分與可隨代謝過程轉移的成分。某種載脂蛋白可出現在一類顆粒上,不代表它就是該顆粒形成所必需的成分,也不代表它只存在於該類顆粒。 二、apo B-48 與 apo B-100 比較項目apo B-48apo B-100 主要合成部位小腸肝臟 代表性脂蛋白乳糜微粒及其殘粒VLDL、IDL、LDL、Lp(a) 結構角色乳糜微粒形成所必需肝源性含 apo B 顆粒的重要結構成分 相對分子量較小較大 一般 HDL 是否含有否否 乳糜微粒由小腸形成,主要運送飲食來源的三酸甘油酯。apo B-48 是其結構骨架,因此不論問主要載脂蛋白、含有哪種 apo B,或形成時必需的成分,判斷核心都是 apo B-48。乳糜微粒也可帶有 apo A-I、apo C-II、apo E,但不以 apo B-100 為組成成分。 VLDL 由肝臟分泌,含 apo B-100。隨著三酸甘油酯被移除,VLDL 可轉變為 IDL,再形成 LDL;這個過程中仍保留 apo B-100。因此,VLDL、IDL、LDL 都屬於含 apo B-100 的脂蛋白。 三、各脂蛋白的典型載脂蛋白組成 脂蛋白典型載脂蛋白辨識關鍵 乳糜微粒apo B-48;亦可有 apo A-I、apo C-II、apo E形成必需 apo B-48,不含 apo B-100 VLDLapo B-100、apo C-II、apo E典型組成不列 apo A-I IDLapo B-100、apo E保留來自 VLDL 的 apo B-100 LDL主要為 apo B-100即 β-lipoprotein HDL主要為 apo A-I、apo A-II;亦可攜帶 apo C、apo E不含 apo B-48、apo B-100 Lp(a)apo B-100、apo(a)LDL 樣顆粒加上 apo(a) 表中列的是一般代謝下的典型組成,部分載脂蛋白的分布會隨顆粒成熟與代謝而變動。例如乳糜微粒進入循環後,可由 HDL 取得 apo C-II 與 apo E;apo A-I 也可見於乳糜微粒,因此不能把 apo A-I 說成 HDL 專有的蛋白質。 β-lipoprotein 指 LDL,其主要載脂蛋白為 apo B-100。看到 β-lipoprotein,應先連結到 LDL,再判斷其蛋白質組成,不要直接聯想到乳糜微粒的 apo B-48。 四、apo A-I、apo A-II 與 HDL 含量 apo A-I 是 HDL 最主要的載脂蛋白,測定 apo A-I 可大概反映 HDL 的含量。apo A-II 也是 HDL 的主要載脂蛋白之一,因此在 HDL、LDL、Lp(a)、VLDL 之間辨識 apo A-II 的代表性分布時,應掌握 HDL。 apo A-I 濃度測量的是蛋白質,HDL 膽固醇測量的則是 HDL 所攜帶的膽固醇,兩者相關,但不是相同的測量項目,不能直接視為相同數值。apo C-II 與 apo E 分布於多類顆粒,不是估算 HDL 含量時最具代表性的選擇。 五、Lp(a) 與分子量比較 Lp(a) 具有含 apo B-100 的 LDL 樣顆粒,並以雙硫鍵與 apo(a) 連結。apo(a) 與 apo A-I 是不同蛋白質;名稱中的「a」不能用來推論 Lp(a) 以 apo A-I 為主要成分。 分子量比較可掌握:apo B-100 > apo B-48 > apo E > apo C-III > apo C-I。因此,在 apo B-48、apo E、apo C-I、apo C-III 之間比較,最大者是 apo B-48;若比較範圍加入 apo B-100,則 apo B-100 更大。作答時先確認比較範圍,不必依賴精確分子量數字。 六、載脂蛋白免疫測定與 Tween 20 載脂蛋白與脂質結合後,其抗原表位的可接近性可能受影響。部分免疫測定試劑加入非離子型界面活性劑 Tween 20,以破壞或鬆動蛋白質與脂質的結合,使抗原表位較容易暴露,利於抗體辨識與反應。 此處應掌握的是「鬆開脂質與蛋白質的結合,方便免疫測定」。其目的不是避免蛋白質過度氧化、避免脂質酯化,也不是調整試劑的 pH 值;更不是將載脂蛋白水解成胺基酸。 常考陷阱 「乳糜微粒的主要載脂蛋白是 apo B-100」:錯在混淆來源;乳糜微粒認 apo B-48,VLDL、IDL、LDL 認 apo B-100。 「乳糜微粒形成必須靠 apo C-II」:apo C-II 參與脂蛋白脂酶的活化;形成顆粒所必需的結構成分是 apo B-48。 「apo A-I 只存在於 HDL」:說法過度絕對。乳糜微粒也可有 apo A-I,但用來大概反映 HDL 含量時,仍以 apo A-I 為代表。 「VLDL 的典型組成包括 apo A-I」:應記 apo B-100、apo C-II、apo E;不要把 HDL 的主要蛋白直接套入 VLDL。 「HDL 含 apo B-100」:一般組成不含;HDL 的主要辨識蛋白是 apo A-I 與 apo A-II。 「Lp(a) 的 apo(a) 取代 apo B-100」:兩者共同存在,apo(a) 是額外連結於 LDL 樣顆粒的蛋白質。 「apo B-48 一定是所有載脂蛋白中最大者」:必須看比較對象;apo B-48 大於 apo E 與 apo C 類,但小於 apo B-100。 「Tween 20 用來抗氧化或調 pH」:判斷關鍵是界面活性作用,以及脂質與蛋白質結合的鬆動。 記憶口訣 「乳糜四八,肝出一百;V、I、L 都帶百,HDL 不帶 B。HDL 有 A 一、A 二,估量先看 A 一;Tween 鬆脂,抗原現形。」