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學習重點 肌酸激酶（CK）催化可逆反應，需以Mg2+作為金屬活化因子；ATP可作為肌酸磷酸生成方向的受質。 CK的重要硫氫基容易氧化，N-acetylcysteine（NAC）或glutathione可保護硫氫基、穩定活性，並使部分氧化失活的CK再活化。 Oliver／Rosalki及CK／HK／G6PD測定利用CK生成ATP，再耦合產生NADPH；溶血釋出的腺苷酸激酶（AK）會增加ATP形成，使結果假性偏高。 血漿檢體宜採肝素抗凝；檢體應及時處理，延後測定須適當冷藏或冷凍，不可認為室溫放置48小時仍不需保存措施。 CK主要反映肌肉損傷；另須掌握anti-CK-M免疫抑制法，以及CK-MM1比CK-MM3更靠近陽極的電泳特性。 核心觀念 一、CK的反應方向與金屬活化因子 CK催化的可逆反應為： 肌酸＋ATP ⇌ 肌酸磷酸＋ADP 在生成肌酸磷酸的方向，ATP提供磷酸基，因此遇到「何種酵素以ATP為必要基質」的比較，應選CK。但不能將ATP固定記成所有CK測定中的受質：常用活性測定採相反方向，以肌酸磷酸及ADP為受質，生成肌酸與ATP。 CK需要Mg2+活化，鎂離子與ATP／ADP形成複合體，參與催化反應。Ca2+不能取代Mg2+；「加入CaCl2作為CK必要活化成分」或「適量Ca2+可提高CK活性檢測」皆非正確觀念。 二、硫氫基保護與NAC的用途 CK活性與酵素的重要硫氫基（－SH）有關。硫氫基氧化、形成雙硫鍵，可使酵素活性降低。試劑加入NAC或glutathione，可維持還原環境，保護硫氫基並恢復部分因氧化而喪失的活性。 NAC的主要目的為穩定、維持或再活化CK，不是去除所有血清干擾物、提高反應特異性或縮短反應時間。已嚴重變性或降解的CK，也不能保證靠NAC完全恢復。 三、Oliver／Rosalki與CK／HK／G6PD活性測定 此類方法將CK生成ATP的速率，轉換成可由分光光度法追蹤的NADPH生成速率。反應依序為： CK：肌酸磷酸＋ADP → 肌酸＋ATP。 Hexokinase（HK）：ATP＋葡萄糖 → ADP＋葡萄糖-6-磷酸。 G6PD：葡萄糖-6-磷酸參與氧化反應，同時使NADP+還原成NADPH。 測定340 nm吸光值的增加速率，即可換算CK活性。NADPH是耦合反應的偵測產物，並非CK直接作用的受質。判讀干擾時，關鍵在於：其他反應若也能生成ATP，便可能被後續耦合系統誤算為CK活性。 四、溶血與腺苷酸激酶干擾 紅血球內沒有具重要檢測意義的CK活性，因此重度溶血的主要問題不是大量紅血球CK釋出，而是紅血球釋出的腺苷酸激酶（adenylate kinase，AK）。其反應為： 2 ADP ⇌ ATP＋AMP AK利用試劑中的ADP產生額外ATP，這些ATP同樣進入HK／G6PD反應，使NADPH生成增加，造成CK測定結果假性偏高。這是重度溶血檢體不適合用於此類CK測定的主要原因。 試劑可加入AMP或diadenosine pentaphosphate（AP5A），抑制或降低AK干擾。加入ADP不能排除此干擾，因為ADP正是AK生成ATP方向的受質。NAC則負責保護CK，不能與AK抑制劑混為一談。 試劑成分主要用途判斷關鍵 Mg2+CK所需金屬活化因子不是Ca2+ NAC、glutathione保護硫氫基，穩定或部分恢復CK活性不是抑制AK AMP、AP5A降低AK干擾不是活化CK ADPCK測定反應的受質也可供AK利用，不能用來排除AK干擾 五、檢體選擇與保存 CK可使用血清或適當的血漿檢體；使用血漿時，宜以肝素作為抗凝劑。CK活性可能隨保存條件而下降，應及時分離及測定；若延後分析，可依方法規範冷藏或冷凍，並避免反覆凍融。不可宣稱CK在室溫非常穩定、放置48小時也不需冷藏。 輕度溶血的血清仍可能用於CK活性測定，須符合該方法的干擾容許範圍；重度溶血則應避免使用。「輕微溶血一定造成嚴重干擾」與「紅血球沒有CK，所以重度溶血也無影響」都不正確。 六、CK升高的臨床意義 狀況CK常見表現與判讀 肌肉失養症／肌肉萎縮症（muscular dystrophy），尤其Duchenne型肌纖維受損，CK常明顯升高 橫紋肌溶解、惡性高熱可伴隨大量肌肉損傷，使CK顯著升高 心肌梗塞心肌損傷可使CK升高，但不能只靠總CK診斷 激烈運動、statins相關肌病、甲狀腺功能低下皆須列入CK升高的可能原因 神經原性肌肉疾病CK常呈正常，不能與原發性肌肉疾病混淆 多發性硬化症通常不造成CK升高 單純肝功能異常不是CK明顯升高的典型解釋 當CK達正常上限的5倍，應考慮激烈運動、statins及甲狀腺功能低下等因素；不能單以肝功能異常解釋。神經原性疾病的CK「常正常」是一般判讀原則，並非所有個案必然正常。 七、CK同功酶與CK-MM亞型 CK主要同功酶包括CK-MM、CK-MB及CK-BB。免疫抑制法常使用anti-CK-M抗體抑制M次單元活性。剩餘的B次單元活性可用於推估CK-MB，但若存在CK-BB等其他成分，可能影響判讀。 組織型CK-MM3進入循環後，可經carboxypeptidases作用依序轉成CK-MM2及CK-MM1。在鹼性電泳中，CK-MM1比CK-MM3更靠近陽極，不可將遷移方向記反。 常考陷阱 「ATP永遠是CK測定的受質」：CK反應可逆；常用CK／HK／G6PD法由CK生成ATP，再進行耦合反應。 「Ca2+是CK必要活化劑」：應選Mg2+，不能以CaCl2取代。 「NAC用來抑制AK」：NAC保護CK硫氫基；AMP及AP5A才用於降低AK干擾。 「溶血使CK偏低，或因紅血球CK大量釋出而偏高」：主要機轉是AK增加ATP生成，造成假性偏高；也不是以血紅素抑制CK或鉀離子活化CK為主要解釋。 「加入ADP可避免AK干擾」：ADP反而是AK的受質。 「CK不能冷藏、冷凍」或「室溫48小時不需冷藏」：皆錯；保存須依方法規範。 「肌肉失養症與神經原性肌肉疾病的CK都正常」：前者常明顯升高，後者常正常。 「CK-MM3比CK-MM1更靠近陽極」：方向相反，較靠近陽極的是CK-MM1。 記憶口訣 「鎂助CK，NAC護硫；溶血出AK，ATP多、讀值高；AMP與AP5A擋干擾，MM1向陽跑。」