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學習重點 掌握血球計數盤的幾何構造：每個大方格面積為 1 mm²，蓋玻片下方深度為 0.1 mm，因此每個大方格的體積為 0.1 mm³。 能由「計數細胞數、計數方格數、稀釋倍率及檢體總體積」逐步求出細胞總數，並正確換算 mL、μL 與 mm³（1 mm³＝1 μL，1 mL＝1000 μL）。 比較血小板計數的電子阻抗法、光散射法及計數盤鏡檢法；比濁透光法屬於血小板凝集功能檢查，不是血球常規檢驗的血小板計數方法。 熟悉周邊血液抹片的血小板估計法：正常情形下，油鏡觀察約 1000 顆紅血球時，可見約 30～100 顆血小板。 核心觀念 一、血球計數盤的構造與體積 血球計數盤用於人工計算細胞的數目或濃度。常用的計數區為 3 mm × 3 mm，分成 9 個大方格；低倍鏡下四個角落的大方格（常標示為 A、B、C、D）用於白血球計數，中央大方格再細分為較小方格，用於紅血球與血小板計數。 判讀時先確認兩個幾何數值： 每個大方格的面積：1 mm × 1 mm＝1 mm²。 蓋玻片與計數盤之間的深度：0.1 mm。 因此，每個大方格所容納的體積為： 1 mm² × 0.1 mm＝0.1 mm³（＝0.1 μL） 計數盤的作用是先取得已知體積中的細胞數，再換算濃度： 細胞濃度（個/mm³）＝計數到的細胞總數 × 稀釋倍率 ÷ 實際計數體積（mm³） 其中，實際計數體積＝計數方格數 × 每格面積 × 深度。 二、由計數盤結果求原檢體細胞總數 以下列情境為例：取 20 μL 白血球檢體，加入 180 μL trypan blue，混合後總體積為 200 μL，因此稀釋倍率為： 200 μL ÷ 20 μL＝10 倍 計數 8 個大方格，共計數 210 顆白血球。這 8 個大方格的總體積為： 8 × 0.1 mm³＝0.8 mm³ 稀釋後檢體的白血球濃度為： 210 ÷ 0.8＝262.5 個/mm³ 再乘回稀釋倍率，可得原檢體的白血球濃度： 262.5 × 10＝2625 個/mm³ 原檢體總體積為 5 mL，而 1 mL＝1000 mm³＝1000 μL，所以： 5 mL＝5000 mm³ 原檢體中的白血球總數為： 2625 個/mm³ × 5000 mm³＝13,125,000 個，約為 1.3 × 10⁷ 個 解題步驟可歸納為：求稀釋倍率 → 求計數體積 → 求濃度並乘回稀釋倍率 → 乘以檢體總體積。 三、血小板計數方法的原理比較 方法 主要原理 判讀重點 電子阻抗法（electronic impedance） 細胞懸浮於導電液中通過小孔時造成電阻改變，產生電脈衝；脈衝數代表細胞數，脈衝大小與細胞體積成正比。 自動血球分析儀最常用的原理；血小板與紅血球依體積大小區分。巨大血小板或小紅血球可能造成干擾。 光散射法（light scattering） 細胞通過雷射光束時產生散射光，依散射訊號判斷細胞大小與內部構造並計數。 屬光學式自動計數原理，可處理大量細胞，區分能力較佳。 計數盤（counting chamber）鏡檢法 將血液稀釋並溶解紅血球後置於血球計數盤，以顯微鏡（明視野或相位差）直接計數血小板。 人工方法，可作為自動計數異常時的確認；結果受取樣、混合、稀釋及計數技巧影響。 比濁透光法（turbidometry）是依懸浮粒子造成透光度改變來測定濁度。在血液學中，它主要用於血小板凝集試驗（加入誘導劑後血小板凝集、血漿變清、透光度上升），評估的是血小板功能，不是血球常規檢驗中計算血小板數目的方法。 四、血液抹片血小板數目估計 血液抹片血小板估計是在油鏡下，於紅血球剛好分開、不重疊的區域觀察周邊血液抹片。估計方式有兩種：一是計算血小板與紅血球的比例，二是計算多個油鏡視野的平均血小板數。再配合紅血球數或換算係數，判斷血小板數量是否正常。 正常情形下，約每 1000 顆紅血球可見 30～100 顆血小板。若觀察到的血小板數明顯少於此範圍，提示血小板減少；若明顯增多，則可能提示血小板增多。抹片估計也可用來核對自動分析儀的結果，例如發現血小板凝集、巨大血小板等造成假性減少的原因。 常考陷阱 把面積當成體積：1 mm² 是每個大方格的面積，不是體積；必須再乘上 0.1 mm 的深度，體積才是 0.1 mm³。選項中的 1 mm³ 是忘記乘深度，0.01 mm³ 是多乘一次 0.1。 算錯稀釋倍率：20 μL 加入 180 μL 是稀釋 10 倍，不是 9 倍。稀釋倍率應以「最終總體積 ÷ 取樣體積」計算。 只算一個大方格：計數幾個大方格，計數體積就要乘幾倍；計數 8 格時體積是 8 × 0.1＝0.8 mm³。 將 5 mL 誤認為 5 mm³：1 mL 等於 1000 mm³，所以 5 mL 是 5000 mm³。單位換算錯誤會讓答案相差好幾個數量級。 混淆濃度與總數：題目問「檢體中共含多少個」時，求得每 mm³ 的細胞數後，必須再乘原檢體總體積，才是細胞總數。 把比濁透光法當成血小板計數法：看到「血小板」加上「比濁」，要聯想到血小板凝集功能試驗，而不是計數。常規計數方法是電子阻抗法、光散射法與計數盤鏡檢法。 把「1000 顆紅血球」看成「1000 倍油鏡」：1000 顆紅血球是血小板估計的比較基準，正常對應血小板數為 30～100 顆。150～200 或 400～500 的數字容易與血小板正常濃度（約 150～400 × 10³/μL）混淆，要分清楚「比例估計」與「實際濃度」。 把抹片估計當成精確定量：抹片法屬半定量估計，血小板分布不均、聚集或觀察區域太厚太薄都會讓結果失真，異常時應以定量方法確認。 記憶口訣 盤深相乘得體積：面積乘深度，1 乘 0.1，大方格體積 0.1 mm³。 數目除體積得濃度，稀釋倍數要乘回；再乘檢體總 mm³，得到完整細胞總數。 計數靠阻抗、散射、計數盤；比濁看凝集，不算數目。 抹片血小板：油鏡看一千紅，正常三十到一百。