學習重點 Euglobulin lysis time(ELT)/euglobulin clot lysis time(ECLT)是評估血液整體纖溶(fibrinolysis)活性的功能性檢驗。凡是題目問「評估纖維蛋白溶解活性」或「纖溶活性的整體評估」,都選這一項。 將血漿稀釋並酸化,在低溫下沉澱出優球蛋白部分。此部分保留 fibrinogen、plasminogen、tPA,而 α2-antiplasmin 與 PAI 等抑制物大多留在上清液中被移除。因此本試驗可避免 plasmin 抑制子的干擾。 判讀方向:溶解時間縮短表示纖溶活性增加,溶解時間延長表示纖溶活性降低。心肌梗塞病人的 ECLT 為縮短。 正常值:60~120 min 與 >120 min 兩種寫法都採認。只在數分鐘到數十分鐘內就溶解,屬於纖溶亢進,不是正常值。 核心觀念 一、檢驗目的與基本原理 Euglobulin lysis time 的目的是分析 fibrinolysis 功能,偵測對象是 fibrinolysis activity。它不測定凝血第十三因子活性,也不測定 cold agglutinins 或 lupus anticoagulant,同樣不評估血小板凝集、內在或外在凝血途徑。 操作流程如下: 取得乏血小板血漿,加水稀釋並以弱酸酸化,置於低溫中,使優球蛋白沉澱。 離心後去除上清液。上清液中含有大部分纖溶抑制物。 將沉澱物以緩衝液重新溶解,加入 thrombin 或鈣離子使其凝固。 於 37°C 觀察,記錄血塊完全溶解所需的時間。 血塊溶解的機制是:沉澱物中的 tPA 把 plasminogen 活化成 plasmin,plasmin 再分解由 fibrinogen 形成的 fibrin。由於抑制物已大幅移除,結果主要反映纖溶酶原活化系統本身的活性。 二、優球蛋白部分的組成 成分是否存在於 euglobulin 中角色 Fibrinogen存在凝固後形成 fibrin 血塊,是被溶解的對象 Plasminogen存在被 tPA 活化成 plasmin,負責分解 fibrin tPA存在纖溶酶原活化劑,啟動纖溶反應 α2-antiplasmin大部分被移除直接抑制 plasmin PAI(PAI-1)大部分被移除抑制 tPA,使 plasmin 生成減少 正因為抑制物被移除,ECLT 對纖溶活性的變化比全血更敏感,溶解速度也遠快於全血凝塊。全血凝塊在正常情況下長時間不會自行溶解,所以 ECLT 的參考值比全血凝塊溶解時間短,而不是比它長。 Plasminogen 是被活化成 plasmin 的前驅物。它的含量高,只會讓纖溶進行得更順利,不會造成偽陰性。真正會干擾結果的是 fibrinogen 的量:fibrinogen 過低時,形成的血塊小而鬆散,容易溶解,可能出現假性縮短。判讀時需要留意這一點。 三、溶解時間與纖溶活性的關係 時間縮短:纖溶活性增加(hyperfibrinolysis)。可見於 tPA 釋放增加,例如急性壓力、劇烈運動、缺血刺激內皮細胞;也見於使用血栓溶解劑,以及部分肝硬化病人等情況。 時間延長:纖溶活性降低(hypofibrinolysis)。可見於 plasminogen 不足、tPA 釋放減少等情況。 心肌梗塞:考題採認的變化是 Euglobulin clot lysis time 縮短。理由是缺血與壓力刺激內皮細胞釋放 tPA,使纖溶活性上升。 四、正常值與判讀 各教材的寫法不同。常見的有 60~120 min,也有以 >120 min(2 小時內不完全溶解)為正常的寫法,這兩種都屬於正確答案。判讀的共同原則是:正常的優球蛋白凝塊需要一段相當長的時間(以小時計)才會溶解。若在數分鐘或數十分鐘內就完全溶解,例如 5~9 min 或 10~60 min,代表纖溶亢進。實際判讀仍以各檢驗室的參考區間為準。 五、容易混淆的試驗 試驗主要用途與 ECLT 的區別 Euglobulin clot lysis time整體纖溶活性本單元唯一的纖溶活性檢驗 Clot solubility test/Urea solubility test以 5 M 尿素等溶劑測試血塊是否可溶,篩檢凝血第十三因子缺乏評估纖維蛋白交聯,不是纖溶活性 Protamine sulfate dilution test偵測可溶性纖維蛋白單體複合物(paracoagulation),協助診斷 DIC偵測凝血活化產物,不是纖溶活性 Ethanol gelation test偵測可溶性纖維蛋白單體,協助診斷 DIC同上 Dilute Russell viper venom time蛇毒直接活化第十因子,用於狼瘡抗凝血劑檢測屬凝血試驗 Clot retraction time血塊收縮,主要反映血小板功能(如 GPIIb/IIIa)與纖溶無關 Plasma recalcification time血漿加鈣後的凝固時間,評估內在凝血系統凝血試驗,不是纖溶試驗 常考陷阱 「測定第十三因子活性」:這是 clot solubility/urea solubility test 的用途。ECLT 的目的是分析 fibrinolysis。 「測定 cold agglutinins/lupus anticoagulant 濃度」:兩者都與 ECLT 無關。lupus anticoagulant 用 dRVVT 等試驗檢測。 「偵測 platelet aggregation、intrinsic 或 extrinsic pathway」:錯誤。ECLT 偵測的是 fibrinolysis activity。 「可以篩檢干擾血塊溶解的球蛋白」:錯誤。euglobulin 是把含纖溶成分的部分沉澱出來,觀察它的溶解速度,並不是在篩檢某種干擾性球蛋白。 「參考值比全血凝塊溶解時間長」:錯誤。抑制物移除後溶解更快,ECLT 較短。 「可以避免 plasmin 抑制子的干擾」:正確。α2-antiplasmin 留在上清液中被移除。 「plasminogen 很高時可能有偽陰性」:錯誤。plasminogen 多只會促進溶解。需要注意的是 fibrinogen 過低可能造成假性縮短。 euglobulin 組成選 α2-antiplasmin 或 PAI:錯誤。正確組合是 fibrinogen、plasminogen、tPA。 心肌梗塞選「延長」或「不一定」:考題答案是縮短。 正常值選 5~9 min 或 10~60 min:這是溶解過快、纖溶亢進的範圍。正常值是 60~120 min 或 >120 min。 記憶口訣 「優球三寶:纖原、酶原、tPA;兩個抑制(α2-AP、PAI)丟上清。」 「溶得快,纖溶強;心梗 tPA 衝,時間縮短。」 「正常要等一兩小時以上,幾分鐘就化是亢進。」