學習重點 ABO 亞型的本質是轉移酶活性減弱,導致抗原量改變。A 或 B 轉移酶活性較弱時,紅血球上的 A、B 抗原較少,未被轉換的 H 物質相對較多。 B3 是國人最常見的 ABO 亞型。典型組合為:紅血球與 anti-B、anti-A,B 呈混合凝集(mixed field),anti-A 陰性;血清與 A1 cells 明顯凝集,與 B cells 不反應。 B3 的其他特性:B transferase 為(弱)陽性、紅血球 H 抗原較一般 B 型多、分泌型者唾液可分泌 B 物質。 正向與反向定型必須合併判讀。兩者不一致時,應想到亞型或弱抗原,並以吸附沖出試驗、唾液試驗等方法鑑定。 吸附沖出試驗可偵測極弱的 A、B 抗原(如 Ael)。抗體吸附條件為 4℃、一小時。 核心觀念 一、H 物質與 A1、A2、B 的關係 H 物質是 A、B 抗原的前驅物。A、B 轉移酶分別把 H 物質轉換成 A 抗原或 B 抗原,因此轉移酶活性越強,A 或 B 抗原越多,殘留的 H 物質越少。 紅血球 H 物質含量的一般順序為:O > A2 > B > A2B > A1 > A1B。A2 的 A 轉移酶活性比 A1 弱,故 A2 紅血球的 A 抗原較少、H 物質較多;在 A2、B、A1、A1B 之中,A2 的 H 物質最多,A1B 最少。B3 的 B 轉移酶活性也較弱,所以 B3 紅血球的 H 抗原比一般 B 型多,絕不是「極少」。 比較項目A1A2B3 轉移酶活性A 轉移酶強A 轉移酶較弱B 轉移酶弱,但仍為陽性 紅血球抗原表現A 抗原多A 抗原較少B 抗原弱,與 anti-B 呈混合凝集 相對 H 物質少多(僅次於 O 型)比一般 B 型多 分泌型唾液A、H 物質A、H 物質B、H 物質 二、混合凝集(mixed field) 混合凝集是指同一試管中同時存在凝集塊與大量未凝集的游離紅血球,表示只有部分紅血球與試劑反應。混合凝集描述的是「病人紅血球與抗血清」的正向定型反應;病人血清中的抗體與試劑血球反應時,看到的是一般強弱的凝集,而不是 B3 的特徵。 三、B3 亞型的典型血清學型態 檢驗項目B3 典型結果判讀 紅血球 × anti-A陰性無 A 抗原 紅血球 × anti-B混合凝集(如 1+mf~3+mf)弱 B 抗原,部分細胞凝集 紅血球 × anti-A,B混合凝集與 anti-B 結果一致 血清 × A1 cells陽性(2+~4+)血清含 anti-A 血清 × B cells陰性血清通常不含 anti-B auto-control陰性排除自體凝集等干擾 只要看到「anti-A 陰性、anti-B 與 anti-A,B 為 mf;A1 cells 陽性、B cells 陰性」,即可判為 B3。凝集強度(1+mf、2+mf、3+mf)可能不同,判讀重點是混合凝集的型態。 四、易混淆的 B 亞型及相關型別 型別紅血球 × anti-B重點特徵 B3混合凝集國人最常見亞型;B transferase 陽性,唾液可分泌 B 物質 Bx微弱凝集,非典型 mf血清可能有弱 anti-B Bm陰性或極弱需吸附沖出試驗;分泌型唾液有 B 物質 Bel陰性僅能以吸附沖出試驗偵測;唾液無 B 物質 Para-Bombay陰性或極弱紅血球 H 抗原缺乏或極弱,與 B3 的 H 較多相反 A3(對照)—anti-A 呈混合凝集,血清含 anti-B;勿與 B3 混淆 五、B3 的其他特性 B transferase 為陽性(活性較弱)。「弱陽性」仍是陽性,寫成「陰性」就是錯的。 紅血球 H 抗原較多。因 B 轉移酶活性弱,部分 H 物質未被轉換。 分泌型者唾液可分泌 B 物質,含量並非極少。 B3 是國人最常見的 ABO 亞型,也是國人最常見的 B 亞型;A2 雖是白種人常見的亞型,但在國人中少見。A3、Ael、Bel、Para-Bombay 也都不是國人最常見的亞型。 六、A 亞型的鑑定:吸附沖出試驗與唾液試驗 若正向定型為 O 型、反向定型為 A 型(血清只有 anti-B、無 anti-A),且 H 抗原為 4+,表示紅血球上可能有極弱、一般試劑測不到的 A 抗原,應懷疑 Am、Ael 等弱 A 亞型,不可直接判為 O 型。 鑑定需同時做兩項試驗: 吸附沖出試驗:證明紅血球上確有微弱 A 抗原。 唾液試驗:檢查唾液中是否含 A 物質,用以區分亞型。例如 Am 的分泌型唾液含 A 物質,Ael 的唾液則無 A 物質,只有 H 物質。 只做其中一項無法完成亞型鑑定;Avidity test 只能評估抗血清的凝集速度與強度,不是此情況的鑑定方法。 七、吸附沖出試驗(absorption-elution test) 步驟為:先將病人紅血球與 anti-A(或 anti-B)混合,於 4℃ 孵育一小時讓抗體吸附到抗原上;洗去未結合的抗體後,以加熱等方法把結合的抗體沖出,再用 A1(或 B)cells 檢測沖出液。若沖出液出現凝集,代表紅血球上確有該抗原。 Ael 的 A 抗原極少,以一般離心法或加熱法都測不出,必須用吸附洗出試驗才能偵測。酸性沖出法(acid-elution test,如 Kleihauer-Betke)是用來檢測胎兒血紅素細胞的方法,不是鑑定 Ael 的方法。 常考陷阱 「國人最常見亞型是 A2」:錯。A2 是白種人常見的亞型,國人最常見的是 B3。 「B3 的血清與 A1 cells 呈混合凝集」:錯。混合凝集出現在紅血球與 anti-B、anti-A,B;血清與 A1 cells 是一般陽性凝集。 「B3 的 B transferase 為陰性」:錯。它為陽性,只是活性較弱。 「B3 紅血球 H 抗原極少」:錯。B 轉移酶弱,H 抗原反而較多;H 極少是 Para-Bombay 的特徵。 「B3 唾液 B 物質極少」:錯。B3 可分泌 B 物質;唾液無 B 物質的是 Bel。 看到 anti-A 呈 mf 就選 B3:錯。mf 出現在 anti-A 且血清有 anti-B 時,屬於 A3 型態;B3 必須是 anti-B 呈 mf、血清有 anti-A。 把 anti-B 為 mf 的結果判成 Bm、Bel:Bm、Bel 與 anti-B 幾乎不凝集,不會出現明顯混合凝集。 「正反定型不符,只做唾液試驗或只做吸附沖出試驗」:兩者都要做才能鑑定 A 亞型。 「H 物質最多的是 A1 或 B」:在 A1、A2、B、A1B 之中,A2 最多,A1B 最少。 吸附孵育條件選 37℃ 或 56℃:抗體吸附是 4℃、一小時;加熱是之後沖出抗體的步驟。 Ael 選酸性沖出法:Ael 要用吸附洗出試驗偵測;酸性沖出法是用來測胎兒血紅素的。 記憶口訣 「國人亞型看 B3,抗 B 混凝血清抗 A;酶仍陽性 H 較多,唾液照樣有 B 物。」 「H 量排序:O、A2、B、A2B、A1、A1B(O 最多,A1B 最少)。」 「正 O 反 A 有 H,吸附沖出加唾液;吸附四度一小時,Ael 靠它才現形。」