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學習重點 區分三種D變異：弱D是D抗原「量」減少，部分D是D抗原「質」改變（缺少部分表位），DEL是D抗原量極低，幾乎測不到。 掌握DEL的分子機轉：國人常見RHD 1227 G>A變異造成mRNA異常剪接，仍能轉譯出少量具功能的D蛋白。例行血清學常判為RhD陰性，須以吸附沖出法證明D抗原存在。 熟悉弱D的反應階段：saline（立即離心）及37℃ phase不凝集，AHG phase及polybrene method可凝集。 建立臨床判斷：Rh陽性病人輸血後產生anti-D，要想到部分D。捐血者只要帶有D抗原（弱D、弱部分D、Trans C抑制性弱D、DEL），血袋一律標示Rh陽性。 了解國人RhD陰性特性：約30%為D(el)。國人產生anti-D的頻率低，anti-D引起的新生兒溶血症罕見。manual polybrene法可以測出anti-D。 核心觀念 一、國人RhD陰性的血清學特性 台灣RhD陰性者比例遠低於白種人，一般約0.3%。血清學判為RhD陰性的國人中，約30%其實是D(el)，紅血球上仍有極微量D抗原。 國人RhD陰性者少，加上相當比例為DEL，因此產生anti-D的頻率很低，anti-D引起的新生兒溶血症罕見，但不是不會發生。anti-D多為IgG，可通過胎盤。 anti-D的檢測方法包括AHG法、manual polybrene法等。Manual polybrene法可以測出anti-D，它是台灣血庫常用的抗體篩檢與交叉試驗方法。 二、弱D、部分D與DEL的比較 類型變異本質血清學特性本身產生anti-D捐血標示 真正RhD陰性無RHD基因或不表現D抗原各階段（含吸附沖出）均無D抗原接觸D抗原後可產生Rh陰性 弱D（Du、遺傳基因弱D）D抗原量減少，表位大致完整立即離心、37℃不凝集；AHG、polybrene凝集一般很少Rh陽性 Trans C抑制性弱DC基因位於D的對側染色體，抑制D表現呈弱D表現D抗原本身正常，少見Rh陽性 部分DD蛋白質變異，缺少一個或多個表位可為陽性或弱陽性，外觀可像Rh陽性可針對缺少的表位產生Rh陽性 弱部分D量減少加上表位缺失常呈弱D型反應可產生Rh陽性 DEL（Del）D抗原量極低，與異常剪接有關例行試驗（含AHG）常陰性，須吸附沖出法證明國人亞洲型DEL很少產生Rh陽性 DEL不是partial D。DEL是抗原「量」極少，表位基本完整；partial D是抗原「質」改變，缺少某些表位。兩者分類依據不同，不可混用名稱。 三、DEL的分子特徵 東方人DEL的基因型多為RHD 1227 G>A。此變異位於exon 9附近的剪接位置，使mRNA轉錄後發生異常剪接（splicing），大部分轉錄產物無法正常表現，只剩少量正常剪接的mRNA。因此RHD基因雖有變異，仍可轉譯出具功能的D蛋白，只是膜上抗原量極低。 四、弱D與DEL的血清學檢測 弱D（Du）紅血球上的D抗原數量少。與anti-D試劑作用時，saline phase（室溫立即離心，RT）及37℃ phase通常不凝集，要到AHG phase才看到凝集。以polybrene method等加強法也能出現凝集。因此判定弱D必須做到AHG階段。 DEL的抗原量更少，連AHG、polybrene、micro-column（凝膠管柱）等方法都常呈陰性，必須使用吸附沖出試驗（absorption-elution test）確認，步驟如下： 讓待測紅血球與anti-D充分作用並吸附。 洗去未結合的抗體。 將結合在紅血球上的anti-D沖出（elution）。 以D陽性試劑紅血球檢測沖出液。 沖出液若含anti-D，即證明待測紅血球上有D抗原。RHD基因分型（如檢出1227 G>A）可作為輔助佐證。 方法一般D陽性弱DDEL真正D陰性 立即離心（saline／RT）+－－－ 37℃+－－－ AHG／polybrene++－－ 吸附沖出+++－ 判讀應用：血球定型時anti-D在例行定型為陰性，此人可能是Rh陰性、弱D或DEL，需進一步做AHG或吸附沖出才能區分。但他最不可能是一般的Rh陽性，因為一般Rh陽性在立即離心就會強凝集。 五、anti-D的形成與輸血選擇 部分D：紅血球有D抗原，定型常為Rh陽性，但缺少某些表位。輸入正常D陽性血後，可針對缺少的表位產生anti-D。因此「Rh陽性病人輸血後產生anti-D」最可能是部分D。 弱D（Du）：D抗原結構大致正常，病人一般不會產生anti-D。其紅血球帶有D抗原，不應把它當作D陰性。 DEL：病人本身帶有D抗原，國人亞洲型DEL很少產生anti-D，輸血時仍可使用D陽性血液。反過來，DEL紅血球帶有D抗原，輸給Rh陰性病人仍可能刺激其產生anti-D，所以不能說「可以輸給Rh陰性病人且不會產生anti-D」。 六、捐血者血袋Rh標示 標示原則是避免D陰性受血者被D抗原致敏。只要紅血球帶有D抗原，不論量多少或表位是否完整，血袋都標示為Rh陽性，包括遺傳基因弱D、Trans C抑制性弱D、弱部分D與DEL。弱部分D同樣帶有D抗原，不可標示為Rh陰性。 常考陷阱 「DEL又稱partial D」：錯。DEL是量極少，partial D是缺表位。 「DEL可輸給Rh陰性病人且不會產生anti-D」：錯。DEL帶有D抗原，仍可能致敏D陰性受血者。 「DEL的RHD變異無法轉譯出D蛋白」：錯。異常剪接後仍有少量正常mRNA，可轉譯出具功能的D蛋白。DEL病人也可輸D陽性血。 確認Del的方法選polybrene、micro-column或hemagglutination inhibition：錯。答案是absorption-elution。 「弱D在saline phase或37℃ phase凝集」：錯。弱D要在AHG phase或polybrene method才凝集。 「Du病人會產生anti-D」「Du在RT phase可見凝集」「Du應當作D(-)」：皆錯。正確的是AHG phase可見凝集。 Rh陽性病人輸血後產生anti-D，選D陰性、Trans C或基因型弱D：錯。要選部分D。 「弱部分D捐血者血液可標示為Rh陰性」：錯。任何帶D抗原的捐血者都標示為Rh陽性。 「Manual polybrene法無法測出anti-D」：錯。polybrene法可測出anti-D。國人anti-D頻率低、anti-D新生兒溶血症罕見、RhD陰性中約30%為Del，這三項都正確。 例行anti-D定型陰性，判斷「最不可能」的血型：答一般Rh陽性。Rh陰性、弱D、DEL都仍有可能。 記憶口訣 弱D「量少」到AHG才凝，部分D「缺位」會生anti-D，DEL「極微」要靠吸附沖出。 DEL三句話：1227 G>A異常剪接、不是partial D、帶D抗原不能給Rh陰性。 捐血標示：有D就標陽性，弱部分D也一樣。 國人Rh陰性：三成是Del，anti-D少見，polybrene測得到。