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學習重點 抗體篩檢是用病人血清（或血漿）與試劑紅血球反應，偵測血清中 ABO 以外的不規則抗體。ABO 與 Rh 以外的其他血型系統抗體，主要靠抗體篩檢試驗檢出。 臨床時機：ABO 分型有爭議、疑似輸血反應造成紅血球破壞、孕婦產前檢查，以及一般輸血前檢查。「直接抗球蛋白試驗陰性」不是執行抗體篩檢的時機。 篩檢細胞與 panel cell 都用 O 型紅血球。依規定篩檢細胞至少須帶有 18 種常見抗原，但不必包含所有紅血球抗原。臺灣的篩檢細胞另含 Mi(a)（Mi III）及 Di(a) 抗原，所以試劑具有族群特異性。 依反應階段判斷抗體性質：室溫或生理鹽水期凝集多為 IgM 冷型抗體，37℃或抗人類球蛋白（AHG）期反應多為 IgG 溫型抗體。篩檢流程必須包括 37℃試驗階段。 反應強度代表參與反應的抗原或抗體劑量，不代表臨床意義。不同細胞的價數不同，不一定表示有兩種以上抗體。 核心觀念 一、抗體篩檢的目的與檢體 不規則抗體篩檢的做法是把病人血清與抗原組成已知的試劑紅血球（screening cells）一起反應，看血清中是否有 ABO 以外的不規則抗體，例如 Rh（anti-E、anti-C）、Kell、Kidd、Duffy、MNS、P、Lewis、Mi(a)、Di(a) 等系統的抗體。除 ABO 與 Rh(D) 外，其他血型系統的抗體要靠抗體篩檢試驗才能檢出。紅血球凝集抑制試驗、吸附沖出試驗與唾液試驗各有其他用途，不負責常規檢出這些抗體。 篩檢的對象是血清中的游離抗體，不是「病人紅血球上的抗體」。偵測紅血球表面已結合的抗體或補體，屬於直接抗球蛋白試驗（DAT）。 新鮮凝固後分離的血清可以用來測試，「不可使用新鮮凝固血清」是錯誤說法。 病人自己的紅血球不能當篩檢細胞。病人血清加自身紅血球屬於自體對照（auto control），用來判斷是否有自體抗體。 篩檢陽性後，再以 panel cell 做抗體鑑定，確認特異性。 二、臨床使用時機 情境是否需要檢測不規則抗體說明 ABO 血型分型有爭議需要血清中的不規則抗體可能干擾反向定型 懷疑輸血反應造成紅血球破壞需要需找出可能引起溶血的異體抗體 孕婦產前檢查需要評估新生兒溶血病的風險 輸血前檢查需要與交叉試驗共同把關輸血安全 直接抗球蛋白試驗陰性不是檢測時機DAT 陰性本身不構成檢測不規則抗體的理由 三、試劑紅血球（篩檢細胞）與 panel cell 篩檢細胞與 panel cell 都用 O 型紅血球製作。O 型細胞不帶 A、B 抗原，不會與病人血清中天然的 anti-A、anti-B 反應，因此任何血型的病人都能使用。 項目篩檢細胞（screening cells）鑑定細胞（panel cells） 用途初步篩檢血清中有無不規則抗體篩檢陽性後，鑑定抗體特異性 血型O 型O 型 細胞數通常 2～3 支多支（常見約 10 支以上） 抗原組成依規定至少帶有 18 種常見抗原，但不需包含所有紅血球抗原各支抗原型態不同且已知，可依反應型態推出抗體 常見的 18 種抗原包括 D、C、c、E、e、K、k、Fy(a)、Fy(b)、Jk(a)、Jk(b)、M、N、S、s、P1、Le(a)、Le(b)。 臺灣本地特色：國人 Mi III（帶 Mi(a) 抗原）及 Di(a) 抗原的頻率比西方人高，anti-Mi(a) 與 anti-Di(a) 在臨床上也有意義。因此臺灣（國人自製或本地使用）的篩檢細胞組會比西方篩檢組增加 Mi(a)（Mi III）及 Di(a) 抗原陽性的細胞。這表示篩檢試劑具有族群特異性。如果只用不含這兩種抗原的西方篩檢組，這兩種抗體就可能漏檢。 四、試驗階段與反應溫度 抗體篩檢必須包括 37℃試驗階段，接著做抗人類球蛋白（AHG）試驗，才能偵測具臨床意義的 IgG 溫型抗體。室溫立即離心或生理鹽水期可以觀察 IgM 抗體，但流程中並沒有獨立的「20℃試驗階段」。 反應階段主要偵測代表抗體臨床意義 室溫／生理鹽水期（立即離心）IgM 冷型抗體anti-P1、anti-N、anti-M、anti-Le(a)、冷型自體抗體（多為 IgM）只在低溫反應者，臨床意義通常較低 37℃期、AHG 期IgG 溫型抗體Rh（anti-E、anti-C、anti-D）、Kell、Kidd（anti-Jk(a)）、Duffy、anti-Di(a)多具臨床意義，可引起溶血性輸血反應或新生兒溶血病 IgM 抗體的最適反應溫度是低溫（室溫以下），不是 37℃。IgM 為五聚體，在生理鹽水中就能直接凝集紅血球。 冷型自體抗體多屬 IgM，不是 IgG。 IgG 溫型抗體通常需在 37℃致敏，再靠 AHG 才能顯現凝集。 五、結果判讀：反應型態與強度 1. 先看自體對照，判斷是自體抗體還是異體抗體 自體對照陰性、篩檢細胞陽性：表示有異體抗體（alloantibody）。 自體對照陽性：提示有自體抗體，或紅血球上已附著抗體（例如近期輸血後）。這不代表實驗操作失敗。 2. 再看反應階段，判斷抗體種類與臨床意義 只在室溫或生理鹽水期陽性、37℃與 AHG 期陰性：多為 IgM 冷型抗體。若自體對照陰性，就是冷型異體抗體，臨床意義可能不重要。 在 37℃或 AHG 期陽性：多為 IgG 溫型抗體，多具臨床意義。 室溫期與 AHG 期都有反應，且各細胞的反應型態不同：可能同時有 IgM 冷型抗體與多種 IgG 溫型抗體，需分別判讀。 反推抗體：如果反應只出現在 37℃或 AHG 期，最不可能是典型 IgM 冷型抗體（例如 anti-P1）。anti-Jk(a)、anti-E、anti-Di(a) 等 IgG 抗體則與這種結果相符。 3. 反應強度的意義 凝集強度（價數）一般代表參與反應的抗原或抗體的劑量，例如劑量效應：同型合子細胞上的抗原量較多，反應較強。 試管中的反應強度不能代表抗體在臨床上的重要程度。弱反應的抗體（例如 Kidd 抗體）仍可能造成嚴重的延遲性溶血反應。 篩檢細胞 1 與 2 的價數不同，可能只是抗原劑量不同，不一定表示有兩種以上抗體，需用 panel cell 鑑定確認。 常考陷阱 「抗體篩檢檢測病人紅血球上的未知抗體」：錯。篩檢檢測的是病人血清中的抗體，紅血球上的抗體屬於 DAT 的範圍。 「病患紅血球可以用來進行抗體篩檢」：錯。病人紅血球只用於自體對照，篩檢一律使用 O 型試劑紅血球。 「試劑紅血球為 A 型懸浮液」／panel cell 為 A、B、AB 型：錯。兩者都是 O 型。 「篩檢細胞必須包含所有紅血球抗原」：錯。依規定至少帶有 18 種常見抗原即可。注意區分「至少 18 種」（正確）與「所有抗原」（錯誤）。 「臺灣市售篩檢細胞都不含 Mi III 及 Di(a)」／「試劑無族群特異性」：錯。臺灣篩檢細胞必須含有 Mi(a)（Mi III）及 Di(a)，因此具有族群特異性。不要誤選 Di(b)、En(a)、K/k。 「DAT 陰性時需檢測不規則抗體」：這不是檢測時機。ABO 分型爭議、疑似輸血溶血、孕婦產檢才是。 「冷型自體抗體多屬 IgG」「IgM 最適反應溫度為 37℃」：錯。冷型抗體多為 IgM，IgM 適合在低溫反應。 「流程中包括 20℃試驗階段」「不可使用新鮮凝固血清」：錯。必要的是 37℃及 AHG 階段，新鮮血清可以使用。 「反應強度可代表抗體的臨床意義」：錯。強度反映的是抗原或抗體的劑量。 「兩支篩檢細胞價數不同，表示一定有兩種以上抗體」：錯。看到「一定」要提高警覺，可能只是劑量效應。 「自體對照陽性表示實驗失敗」：錯。這提示有自體抗體或紅血球已被致敏。 判讀題：自體對照陰性代表異體抗體，不是自體抗體。只在室溫期反應，通常臨床意義不重要。只在 37℃／AHG 期反應時，排除 anti-P1、anti-N 等 IgM 冷型抗體。 記憶口訣 「血清找抗體，O 型細胞供抗原；十八種打底，台灣加 Mi、Di；冷 M 溫 G，必做 37；強度看劑量，意義另判讀；自對陰性是異體，自對陽性非失敗。」