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學習重點 先看反應期與溫度，判斷冷型或溫型：冷型自體抗體（多為 IgM）在立即離心期、室溫或低溫反應最強，抗球蛋白期弱或無反應。溫型自體抗體（多為 IgG）在 37°C 及抗球蛋白期反應明顯，且自體對照多為陽性。 自體對照陽性只能證明有自體抗體，不能排除異體抗體：自體抗體可能掩蔽同時存在、具臨床意義的異體抗體，必須經處理後再確認。 冷型干擾用預溫法，溫型干擾用吸附法：預溫法無法避開溫型 IgG 自體抗體。有自體抗體時，交叉試驗前的關鍵處理是吸附（adsorption，考題常寫作 Absorption）。 是否近期輸血決定吸附方式：近三個月未輸血可做自體吸附（常先以 ZZAP 處理病人紅血球）。近期輸過血不宜自體吸附，應改用異體吸附。 自體抗體可能干擾 ABO 血型檢驗，尤其是冷型自體抗體。 核心觀念 一、冷型與溫型自體抗體的辨識 項目冷型自體抗體溫型自體抗體 主要免疫球蛋白多為 IgM（常見 anti-I）多為 IgG 反應最強的時期立即離心期、室溫、4°C37°C 及抗球蛋白期（IAT） 篩檢細胞與自體對照篩檢細胞多數或全部陽性，自體對照常陽性；抗球蛋白期弱陽性多為補體結合造成篩檢細胞多數或全部陽性，自體對照及 DAT 陽性 臍帶血細胞anti-I 與臍帶血細胞（i 抗原為主）不反應或反應很弱不具此特徵 DTT 處理血清IgM 被破壞，反應明顯降低或消失IgG 不受影響，反應不會消失 配血干擾的處理預溫法（必要時冷自體吸附）自體吸附（ZZAP 處理）或異體吸附 相關臨床冷凝集素症；Mycoplasma pneumoniae、EBV 感染等溫型自體免疫溶血性貧血（WAIHA）、藥物、自體免疫疾病等 判讀時要把各期反應強度、自體對照、細胞間反應是否一致放在一起看。舉例來說，若立即離心期強陽性（例如 3+），抗球蛋白期只有弱陽性，自體對照反應相似，而臍帶血細胞不反應，就是典型的冷型 anti-I 自體抗體。若篩檢細胞在抗球蛋白期普遍陽性，自體對照也陽性，則是溫型自體抗體的表現。 二、自體抗體存在時，異體抗體不能直接排除 自體抗體會與幾乎所有紅血球反應，包括病人自己的細胞。異體抗體只會與帶有相應抗原的外來紅血球反應。病人過去的輸血或妊娠都可能產生異體抗體，所以即使「近三個月未曾輸血」，也不能據此斷定沒有異體抗體。 自體抗體造成的廣泛陽性會掩蔽異體抗體，因此正確的結論通常是「有自體抗體，但尚未排除異體抗體」。要確認是否另有異體抗體，必須先以吸附去除自體抗體，再用吸附後的血清做抗體篩檢與鑑定。 此外，抗體篩檢陽性不能直接判定為 IgG 不規則抗體。IgM 冷型抗體同樣能造成篩檢陽性，必須看反應出現在哪一期。 三、自體抗體對 ABO 血型檢驗的干擾 冷型自體抗體在室溫下會使病人紅血球自行凝集，造成正向定型假陽性，例如誤判為 AB 型。血清中的冷抗體也會凝集 A1、B 試劑細胞，造成反向定型多出反應，使正反向定型不一致。溫型自體抗體包被紅血球時，也可能使檢驗出現異常反應。 因此病人有自體抗體時，應想到 ABO 血型檢驗可能受到干擾。常見的處理方式是以 37°C 溫生理食鹽水清洗病人紅血球、在 37°C 下進行反向定型，或以 DTT 處理紅血球去除 IgM 造成的自發凝集，再重新定型。 四、預溫法：避開冷型抗體 預溫法的作法是把病人血清與試劑或捐血者紅血球分別預熱至 37°C 後再混合，於 37°C 反應，再以 37°C 溫生理食鹽水清洗後進行抗球蛋白試驗。此法不判讀立即離心期，並建議使用抗 IgG 單株試劑，以免偵測到冷抗體結合的補體。 預溫法的原理是讓冷型抗體沒有適合反應的溫度，並不是把抗體去除。它只適用於冷型抗體干擾。溫型 IgG 自體抗體在 37°C 照樣反應，用預溫法無法避開。 近期輸過血的病人若出現冷型自體抗體干擾（立即離心期強陽性、抗球蛋白期弱陽性、自體對照相似、臍帶血細胞陰性），交叉試驗應採預溫試驗。理由有三： 這類抗體在 37°C 不反應，預溫就能排除干擾。 病人近期輸過血，血中混有捐血者紅血球，此時不宜做自體吸附。 冷型 anti-I 不需要向稀有捐血者求血。 以 PEG 加強反應只會讓干擾更嚴重，也不適合。 五、吸附法：交叉試驗前去除自體抗體 病人有自體抗體時，交叉試驗前應先進行吸附，用紅血球把血清中游離的自體抗體吸走，再以吸附後的血清做抗體篩檢、鑑定及交叉試驗。注意以下兩種操作都不是處理血清中游離自體抗體的方法： 洗脫（Elution）：把已結合在紅血球上的抗體釋放下來，用來鑑定包被在紅血球上的抗體，不是去除血清中的自體抗體。 清洗（Washing）：只能去除未結合的血清蛋白，也無法移除血清中的自體抗體。 吸附方式適用情況重點 溫自體吸附（37°C）溫型自體抗體，且近三個月未輸血常先用 ZZAP（酵素 papain/ficin 加 DTT）處理病人紅血球。ZZAP 可移除紅血球上已結合的 IgG，空出抗原位置，並增強吸附效率。病人細胞不帶有其異體抗體所針對的抗原，所以異體抗體會留在上清液中，可被偵測。 冷自體吸附（4°C）冷型自體抗體，且近期未輸血用於去除冷抗體後做檢驗 異體吸附（allogeneic adsorption）近三個月內輸過血，或自體紅血球不足近期輸血者血中有捐血者紅血球，自體吸附時可能把異體抗體一併吸走，所以改用已知表現型的同種紅血球進行吸附 ZZAP 會破壞部分抗原，例如 M、N、S、Duffy、Kell 等，判讀吸附後結果時要考慮這一點。DTT 也會破壞 Kell 系統抗原，所以 DTT 處理不能拿來「消除」溫型 IgG 自體抗體的反應。 六、配血前的處理流程 查明輸血史與妊娠史，特別確認近三個月內是否輸過血。 依各期反應、自體對照、DAT、臍帶血細胞反應，判斷冷型或溫型。 冷型干擾：使用預溫法進行篩檢與交叉試驗，並注意 ABO 定型是否受干擾。 溫型干擾：近期未輸血者做 ZZAP 自體吸附，近期輸過血者做異體吸附，再以吸附後的血清篩檢、鑑定異體抗體並交叉試驗。 確認有臨床意義的異體抗體後，選擇相應抗原陰性的血液。 常考陷阱 「自體對照陽性，已排除異體抗體」：錯誤。自體抗體會掩蔽異體抗體，正確說法是「未排除仍有異體抗體」。 「病人有溫型自體抗體，可用預溫法避開干擾」：錯誤。預溫法只能避開冷型抗體，溫型 IgG 在 37°C 仍會反應，應改用吸附。 「加入 DTT 後，溫型抗體反應明顯降低或消失」：錯誤。DTT 破壞的是 IgM，IgG 反應不受影響。 「病人有冷型抗體，可能有 Mycoplasma 感染，應做冷型抗體鑑定 Panel」：先看反應期。若抗球蛋白期陽性且自體對照陽性，屬於溫型表現，冷型的說法並不成立。 「抗體篩檢陽性，所以是 IgG 不規則抗體」：錯誤。要依反應期判斷，而且自體抗體也會使篩檢陽性。 「自體抗體不會影響 ABO 血型檢驗」：錯誤。冷型自體抗體會造成正反向定型不一致。 「近期輸過血仍做自體吸附」：錯誤。血中的捐血者紅血球可能吸走異體抗體，應改用異體吸附。冷型干擾則直接用預溫法。 「用 PEG 加強反應」「直接向稀有捐血者要血」：PEG 會加重自體抗體干擾。冷型 anti-I 也不需要稀有血。 交叉試驗前的處理選 Elution、Washing 或 Heating：錯誤。正確答案是吸附（Absorption/Adsorption）。 臍帶血細胞陰性而其他細胞全陽性：這是 anti-I 冷型自體抗體的線索，不是異體抗體。 記憶口訣 冷的預溫，暖的吸附； 沒輸血用自己（ZZAP 自體吸附），有輸血借別人（異體吸附）； 自體陽性別放心，異體抗體還沒排除； DTT 只砍 IgM，臍帶不凝想 anti-I。