學習重點 比較三種幹細胞來源:周邊血、骨髓與臍帶血在取得方式、捐贈者風險、植入及血球恢復速度、GVHD風險與HLA配對要求上各有特性。一般而言,周邊血恢復最快,臍帶血最慢。 HLA是異體移植的首要條件:能否執行異體移植,最重要取決於捐贈者與受贈者的HLA相容性。ABO血型、性別及親屬關係都不能取代HLA。 動員用G-CSF,品管看CD34:周邊血幹細胞採集前最常施打G-CSF,不是紅血球生成素。收集後以流式細胞術定量CD34陽性細胞,用來評估造血幹/前驅細胞的數量與品質。 ABO不合仍可移植:此時紅血球、血漿與血小板血品都須同時與受贈者及捐贈者相容。A型病人接受B型幹細胞時,選O型紅血球、AB型血漿、優先AB型血小板。 核心觀念 一、造血幹細胞來源與比較 異體造血幹細胞的來源包括骨髓、周邊血幹細胞及臍帶血,臍帶血目前也是常用來源之一。 項目周邊血幹細胞骨髓幹細胞臍帶血幹細胞 取得方式捐贈者先施打G-CSF,將幹細胞動員至周邊血,再以血球分離術收集,不需麻醉。由髂骨抽取骨髓液,通常需全身麻醉才能抽取足夠髓量,侵入性較高。於新生兒出生、胎盤娩出後由臍帶及胎盤收集,母嬰幾乎沒有採集風險。 捐贈者風險主要來自動員藥物的副作用,例如骨痛,以及分離術的不適。相對最高,涉及麻醉及穿刺風險。最低。 植入及血球恢復最快,嗜中性球及血小板恢復最快。介於周邊血與臍帶血之間。最慢,因細胞數量有限,嗜中性球與血小板恢復時間最長。 GVHD風險成熟T細胞含量最多,GVHD(尤其慢性GVHD)風險較高。介於兩者之間。T細胞較不成熟,GVHD風險相對較低。 HLA配對要求要求嚴格。要求嚴格。最寬鬆,可接受部分HLA不完全相合。 病毒傳播風險屬成人捐贈者,須經完整感染篩檢。新生兒來源,受潛伏病毒感染的機會相對較低,並非風險最高。 二、HLA是異體移植能否執行的關鍵 HLA(人類白血球抗原)是主要組織相容性抗原。捐、受贈者的HLA相合程度,直接決定排斥、植入失敗及GVHD的風險。因此異體造血幹細胞移植能否執行,最重要的是HLA的donor/recipient相容性。 ABO血型:不合時仍可移植,只需在移植過程中選擇適當血品支持,所以不是決定能否移植的首要條件。 性別:不影響移植能否執行。 親屬關係:親屬只是較有機會HLA相合,本身不等於相合;非親屬只要HLA相合,同樣可以移植。 三、幹細胞動員、CD34與成品品質 動員:周邊血幹細胞採集前,最常用G-CSF(顆粒球集落刺激因子),促使骨髓中的造血幹/前驅細胞釋放到周邊血。GM-CSF不是最常用的動員劑。紅血球生成素(EPO)只促進紅血球生成,不用於幹細胞動員。 CD34:CD34是造血幹細胞及造血前驅細胞(HPCs)的主要表面抗原。收集後的成品必須以流式細胞術定量CD34陽性細胞數,用來: 確認幹細胞收集量是否足夠,判斷是否達到移植所需的細胞數。 評估成品中造血前驅幹細胞的數量與品質,並可搭配活性染劑判斷細胞存活狀況。 流式細胞術可應用於骨髓移植,關鍵在於它能藉CD34標記定量多能性造血幹細胞(pluripotential stem cells)。單純定量紅血球、顆粒球或淋巴球的前驅細胞,並不是它在移植上的主要用途。 冷凍保存:造血幹細胞成品最常用DMSO(二甲基亞碸)作為冷凍保護劑。甘油用於紅血球的冷凍保存,不是幹細胞的冷凍保護劑。 預防GVHD:GVHD主要由捐贈者的T細胞攻擊受贈者組織所引起,預防方法是去除T細胞或使用免疫抑制,而不是去除嗜中性球。 四、ABO血型不合移植的血品選擇 ABO不合依抗體方向分為三類: 主要不合:受贈者的抗體會攻擊捐贈者紅血球抗原,例如O型病人接受A型幹細胞。 次要不合:捐贈者的抗體會攻擊受贈者紅血球,例如A型病人接受O型幹細胞。 雙向不合:兩種情形同時存在,例如A型病人接受B型幹細胞。 移植期間,受贈者體內同時存在受贈者與捐贈者兩套抗原及抗體來源,選血的共同原則如下: 血品選擇原則 紅血球濃厚液紅血球上不可帶有受贈者或捐贈者會產生抗體的抗原。雙向不合時只能選O型。 新鮮冷凍血漿血漿中不可含有會攻擊受贈者或捐贈者紅血球的抗體。雙向不合時選AB型。 血小板血品製品中含有血漿,因此比照血漿原則,優先選擇抗體與雙方都相容的血型。雙向不合時優先選AB型。 典型例子:受贈者A型,捐贈者B型(雙向不合) 血品選擇理由 紅血球濃厚液O型不含A、B抗原。受贈者殘存的抗B,以及捐贈者淋巴球產生的抗A,都不會破壞輸入的紅血球。 新鮮冷凍血漿AB型不含抗A及抗B,不會攻擊受贈者的A型紅血球,也不會攻擊捐贈者來源的B型紅血球。 血小板血品優先AB型製品中的血漿不含抗A、抗B,對雙方都相容。 結論:O型紅血球+AB型血漿+AB型血小板。選血不能只依受贈者或只依捐贈者的血型,必須同時兼顧兩方。 常考陷阱 「臍帶血捐贈者風險最高」:錯。臍帶血在胎盤娩出後才收集,捐贈風險最低。風險最高的是需要全身麻醉的骨髓捐贈。 「臍帶血傳播病毒的風險最高」:錯。臍帶血來自新生兒,潛伏病毒感染的機會相對較低。 「周邊血幹細胞移植的HLA配合度最寬鬆」:錯。HLA配對最寬鬆的是臍帶血;周邊血的特點是恢復最快、GVHD較多。 「臍帶血的顆粒球及血小板恢復最慢」:對。三種來源中臍帶血細胞數最少,恢復最慢。 「周邊血幹細胞捐贈者須事先施打紅血球生長激素」:錯。應施打G-CSF(顆粒球生長激素)。這個選項常拿EPO替換G-CSF來設陷阱。 「骨髓捐贈通常需全身麻醉」「周邊血移植的血球恢復較快」「臍帶血是異體幹細胞來源之一」:都是正確敘述。 「動員最常用GM-CSF」:錯。最常用的是G-CSF。 「冷凍保存最常用甘油」:錯。幹細胞用DMSO,甘油用於紅血球。 「去除嗜中性球可預防GVHD」:錯。GVHD由T細胞造成,應去除的是T細胞。 「收集後檢驗CD34陽性細胞數以確認收集量」:對。這是幹細胞成品的核心品管項目。 混淆CD標記: CD4:輔助型T細胞。 CD20:B細胞。 CD33:骨髓系(髓系)細胞。 CD38:活化淋巴球及漿細胞,最原始的幹細胞表現為CD34陽性、CD38陰性。 CD59:補體調節蛋白,與PNH有關。 造血幹細胞的主要表面抗原是CD34。 流式細胞術用於骨髓移植的理由:是它能定量多能性造血幹細胞,而不是定量紅血球、顆粒球或淋巴球的前驅細胞。 決定能否移植的檢驗:答案是HLA,不是血型、性別或親屬關係。 ABO不合的選血: 選項若出現A型紅血球、B型血漿,就是只顧受贈者或只顧捐贈者,錯誤。 O型血漿含抗A、抗B,不可用於此情況。 O型血小板的血漿也含抗A、抗B,血小板應優先選AB型。 記憶口訣 「周邊最快、臍帶最慢;臍帶配對最寬、捐贈最安;動員G-CSF、凍存DMSO;HLA定生死、CD34算數量;紅球選O、血漿血小板選AB。」