三、王先生研究發現某土壤野生菌之Ｘ蛋白質具有高度醫用的潛力，並於搜尋網路資料 後找到其 DNA 基序，他決定利用大腸桿菌（E. coli）選殖（cloning）該 X 基因以 便更進一步評估。請敘述如何選用下列適當的材料及方法為王先生設計一個可行之 選殖策略及實驗步驟。（25 分） 材料：大腸桿菌DH5α菌株、細菌質體（plasmid DNA）其具完整之轉錄單位（ transcriptional unit）且在該 動子（promoter）後含一個多重選殖插位（ multiple cloning site）、抗生素（antibiotics）、限制酶（restriction enzymes）、 DNA結合酶（T4 DNA ligase）、DNA聚合酶（T4 DNA polymerase）、T4 聚 核苷酸激酶（T4 polynucleotide kinase），去磷酸基酶（phosphotase），Tag DNA polymerase、自行設計之DNA引子（primers）、抽取菌體DNA或質體 DNA之套件（chromosomal DNA or plasmid DNA purification kit）、純化DNA 片段之套件（DNA fragment purification kit），Ｘ蛋白質的專ㄧ抗體（anti-X protein-specific antibodies）、瓊膠（agarose gel）、SDS-PAGE、及電泳分析 設備等、或你認為其他選殖必備的材料。
方法：細菌轉形法（transformation）、電穿透法（electroproration）、聚合酶連鎖 反應（polymerase chain reaction，PCR）、含細菌蛋白質萃取物之製備、西 方點墨法（western blotting）、DNA序列分析（DNA sequencing）等、或你 認為其他選殖必須使用的方法。
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