27.使用HPLC分析serine時,下列何種策略最不合適?
(A)使用酸性的移動相,搭配C18管柱進行分析
(B)使用鹼性的移動相,搭配HILIC(hydrophilic interaction chromatography)管柱進行分析
(C)使用酸性的移動相,搭配陽離子交換管柱進行分析
(D)使用鹼性的移動相,搭配陰離子交換管柱進行分析
統計: A(1666), B(396), C(346), D(282), E(0) #3488295
詳解 (共 8 筆)
(A)Serine 為高度極性,在酸性條件下帶正電的胺基酸。在C18逆向層析上無法被滯留,一下下就跑出來了,層析效果不好。酸性流動相也無法顯著提升其保留,因此不合適。
(B)HILIC:專長分離極性化合物;在鹼性條件下 serine帶負電,可被滯留,分析效果好。
(C)陽離子交換:酸性下serine帶正電,可被CEX滯留。
(D)陰離子交換:鹼性下serine帶負電,可被AEX滯留。

所以胺基酸是兩性物質,帶正電或負電依照周圍環境改變
會這題,也不算是會,因為還可以多考pI等電點,因此不能只背這題
另外HILIC 是專門分析高極性化合物的模式,極性越高滯留越強。在鹼性下 serine 帶負電,仍然高度親水,可以被 HILIC 保留。
原文書有提到一樣的概念。極性越強或與電荷產生靜電吸引力者,滯留時間越長。
答案 (A)
serine 是很極性的胺基酸(有 OH、NH2、COOH),在 C18 上幾乎留不住,酸性移動相下又帶正電,會直接衝出來,所以 (A) 最不合適。
(B) HILIC 本來就是為極性分子設計的,可以。
(C) 酸性下 serine 帶正電,用陽離子交換可以。
(D) 鹼性下 serine 帶負電,用陰離子交換可以。
記:極性小分子(胺基酸、醣)→ HILIC 或離子交換,不要硬上 C18。
C18 屬於疏水性的管柱。Serine 親水,在酸性移動相下帶正電,極性很高。兩者缺乏疏水性交互作用,導致 Serine 無法有效滯留於管柱中,無法達到分離效果。