醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學題庫下載題庫

次世代定序（Next-Generation Sequencing, NGS） 是基於高通量平行處理技術的 DNA 定序方法，它的核心是能同時分析大量 DNA 片段。NGS 方法已取代傳統的 Sanger 定序 在大規模分析中的應用。以下是各個選項的解析：

選項解析：

A. 焦磷酸定序（pyrosequencing）

• 應用於次世代定序（如 454 平台）。

• 透過測量每次核苷酸聚合時釋放的焦磷酸信號，來進行序列讀取。

• 已被更高效的技術取代，但歷史上是 NGS 的先驅之一。

B. 半導體定序（semiconductor sequencing）

• 應用於 Ion Torrent NGS 平台。

• 基於檢測 DNA 聚合反應時釋放的氫離子造成的 pH 值變化。

• 此技術不需要螢光標記，簡化了操作流程。

C. 可逆式中斷子定序（reversible terminator sequencing）

• 應用於 Illumina NGS 平台，目前是 NGS 最主流的技術之一。

• 利用帶有螢光標記的可逆性中斷核苷酸，讓每次加入一個核苷酸後可暫停，進行螢光檢測，然後再繼續反應。

D. 桑格定序（Sanger sequencing）

• 非次世代定序技術，是第一代 DNA 定序技術。

• 主要透過 雙去氧核苷酸（dideoxynucleotides, ddNTPs） 終止 DNA 延伸來產生不同長度的 DNA 片段。

• 雖然仍應用於小規模、單基因分析，但不具備 NGS 所需的高通量能力。

總結：

次世代定序採用如 焦磷酸定序、半導體定序、可逆式中斷子定序 等技術，以達到高通量分析的目的，而 Sanger 定序 因其低通量性質，不屬於次世代定序的一部分。

正確答案：D. 桑格定序（Sanger sequencing）